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fluffylee

铜虫 (小有名气)

[求助] LC-DAD测丙烯酰胺标样含量_关于流动相的问题

HPLC系统用C18柱子和DAD测丙烯酰胺标样含量,丙烯酰胺标样溶在水里测,为什么50%甲醇+50%水等度洗脱的LC系统压强比20%甲醇+80%水的还大?是不是50%甲醇+50%水是甲醇和水任意比例混合中会造成LC系统压强最大的一个配比?是什么原理呢?
还有增加了水的比例后,出峰时间反而延长了是什么原因?按理说丙烯酰胺强极性,C18非极性,水强极性,流动相水比例增加了出峰不是应该快吗?还是我整个记反了?= =
望高人解答!
谢谢!
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放花如雪

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fluffylee: 金币+1, 有帮助 2014-03-07 14:20:01
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来分析版~ 2014-03-07 20:16:26
甲醇-水=50:50时,系统压力是最高的,醇高或者水高,压力相应都会低一点。尽量不要使用50:50
2楼2014-03-07 13:21:41
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 放花如雪 at 2014-03-07 13:21:41
甲醇-水=50:50时,系统压力是最高的,醇高或者水高,压力相应都会低一点。尽量不要使用50:50

谢谢!请问是什么原因呢?
3楼2014-03-07 14:19:48
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放花如雪

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
fluffylee: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-08 07:09:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by fluffylee at 2014-03-07 14:19:48
谢谢!请问是什么原因呢?...

与混合溶剂黏度有关,在甲醇与水1:1时,溶液黏度最大,使得系统压力也是最大。再有工作经验:考察不同甲醇水系统不同比例时,50:50附近压力是最大的。
4楼2014-03-07 22:13:51
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 放花如雪 at 2014-03-07 22:13:51
与混合溶剂黏度有关,在甲醇与水1:1时,溶液黏度最大,使得系统压力也是最大。再有工作经验:考察不同甲醇水系统不同比例时,50:50附近压力是最大的。...

非常感谢!
5楼2014-03-08 07:09:37
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 放花如雪 at 2014-03-07 22:13:51
与混合溶剂黏度有关,在甲醇与水1:1时,溶液黏度最大,使得系统压力也是最大。再有工作经验:考察不同甲醇水系统不同比例时,50:50附近压力是最大的。...

你知道第二个关于增加水比例出峰时间反而延长是什么原因吗?还是因为压强吗?
6楼2014-03-08 07:10:21
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放花如雪

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fluffylee at 2014-03-08 07:10:21
你知道第二个关于增加水比例出峰时间反而延长是什么原因吗?还是因为压强吗?...

第二个问题:在非极性C18柱下,主要靠有机相进行洗脱,即有机相比例越高,样品越早被洗脱。
7楼2014-03-08 08:50:43
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 放花如雪 at 2014-03-08 08:50:43
第二个问题:在非极性C18柱下,主要靠有机相进行洗脱,即有机相比例越高,样品越早被洗脱。...

跟水的极性没关系吗?那用水做流动相是什么原因呢?如果两个流动相都是有机相的话是不是就要看极性了?如果极性大的有机相(比如乙腈和甲醇中的甲醇)比例高,洗脱时间就短?
8楼2014-03-08 10:24:24
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

希望有人能回答下我第二个问题~我绕进去了T T 为什么增加水相比例洗脱时间反而长了呢····不是相似相溶吗?
9楼2014-03-08 17:34:37
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