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jjwhl

银虫 (正式写手)

[求助] 重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下 已有6人参与

小虫再做大肠杆菌重组质粒(线性质粒加目的基因共6700左右)提取,结果提取片段跑胶 比10000还大,请各位大侠给指点一下
重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下
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ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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jjwhl: 金币+2, 有帮助 2014-03-06 07:46:55
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:56:06
质粒的大小和marker没关系的。就是说一般的marker对质粒大小的判断意义不大
另外你这marker跑的也太烂了吧。质粒3条带没问题,但是感觉3条带后面有杂带,这个就说明可能有别的比如基因组DNA的污染!!
此外这是我今天见到的第二个用质粒电泳大小判断有没有连上的虫子。觉得非常诧异,酶切、PCR鉴定都是非常好的办法,仅仅根据大小判断这个是没依据的
11楼2014-03-06 00:09:49
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jjwhl

银虫 (正式写手)

这是载体自连接吗?求指导
2楼2014-03-05 16:04:38
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

你这是跑的质粒?建议单酶切后与原先的载体对比一下。
3楼2014-03-05 16:10:47
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forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:38
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。
4楼2014-03-05 16:55:41
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