| 查看: 3718 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
用LB培养BL21(DE3)菌体总是死亡，求助！ 已有8人参与
|
||
|
我最近做原核表达，用BL21(DE3)，质粒PET32，我用保存的菌株划板、挑斑活化，用LB在37℃加氨苄培养，刚开始菌体扩增，可是过两个小时后总是死亡（由之前的乳黄状变成带渣滓的清澈状）。我没有加IPTG，只是纯粹扩增，最近总是这样。 同时做的其他蛋白都这样，而且之前做的挺好，说明不是毒蛋白的原因，而且活化的菌株应该没问题，因为刚开始我小量诱导很正常，四度保存过几天慢慢就不好了。有时候刚刚挑的斑也会摇不起来。LB我们都不调pH，之前做的挺好，我换了各种公司的去离子水，应该排除水质问题。各位大虾有没有遇到过类似情况的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有3人回复
-
想换工作。大多数高校都是 评职称时 认可5年内在原单位取得的成果吗？
已经有7人回复
-
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言
已经有4人回复
-
自荐读博
已经有4人回复
-
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有4人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有10人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
-
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）
已经有3人回复
13楼2015-10-20 00:53:15
2楼2014-02-25 12:12:10
3楼2014-02-25 12:47:10
4楼2014-02-25 14:11:31