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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] 小片段DNA的回收问题已有3人参与

各位老师,师兄师姐,这两天做胶回收,回收产物的浓度很低只有60ng/ul的样子。用OMEGA的胶回收试剂盒回收,回收效率低。怎么改进使回收效率高点呢?急请教指点,谢谢啦
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没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 小尾巴亚杰 at 2014-02-27 18:31:08
胶充分溶解以后,等晾凉了在过柱子,假如第一次往柱子里加了500ul,离下去了,再倒柱子上离,这样弄三四次,弃掉,在把剩下的加柱子里,在这样重复,然后在加500ul溶胶液离一次,在加wash buffer 离一次,在空甩2mi ...

我也是这样做的,但是不是所有的都很理想,一般还是很难达到200ng/ul
的浓度,可能柱子回收小片段DNA还是有限的吧?之前1000bp左右的目的片段,一次PCR回收浓度都在200-300ng/ul左右的
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19楼2014-02-28 11:05:03
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 18:29:53
weiyuanzheng: 金币+5, ★★★很有帮助, 很热心 2014-02-27 09:20:09
1.过柱子的时候过3-4次。
2.加elution要预热。
3.胶要完全融。
2楼2014-02-24 15:24:44
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红茶小麦

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
柱子要用 buffer GPS 预处理,操作步骤试剂盒例应该有说明书
3楼2014-02-24 16:26:09
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

没用过这个试剂盒,我们用的是另外一个公司的,但是我觉得前一步后最后一步一般可以重复一次
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-02-24 16:32:50
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