应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酿酒酵母破胞问题求助
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 3583  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三蛰

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-02-24 20:02:15
衰亡期和对数期破胞现象会不一样吗？...

我也不知道具体的依据，只是我做实验时，用衰亡的细胞离心后，ep管底会有一点黑色。但是对数生长期的不会有。
赞一下(1人) 回复此楼
我不会！
11楼2014-02-24 22:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingbi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
飘逸的云: 金币+2, ★有帮助 2014-02-25 09:04:07
超声破碎要考虑探头的粗细、处理样品的量、容器的大小等，摸索一下条件，一般400W的用功率70-80%  间隔时间延长些，破20min 镜检看看破的怎么样。或者小功率破的时间延长。破黑了，有两个原因，一个是冰浴时间不够，热交换时间段，一个是功率太大，时间长，碳化了，降低功率
赞一下 回复此楼
12楼2014-02-24 22:29:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lingbi at 2014-02-24 22:29:39
超声破碎要考虑探头的粗细、处理样品的量、容器的大小等，摸索一下条件，一般400W的用功率70-80%  间隔时间延长些，破20min 镜检看看破的怎么样。或者小功率破的时间延长。破黑了，有两个原因，一个是冰浴时间不够， ...

谢谢指点！请问你做过酵母破胞实验吗？能不能具体提供一些方法指导一下
赞一下 回复此楼
13楼2014-02-25 09:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
反复冻融好像也可以。
赞一下 回复此楼
14楼2014-02-25 11:16:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-25 11:16:03
反复冻融好像也可以。

反复冻融效果应该不好吧
赞一下 回复此楼
15楼2014-02-25 11:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-02-25 11:43:24
反复冻融效果应该不好吧...

恩  好像是   实验室的师兄搞过   蛋白不多
赞一下 回复此楼
16楼2014-02-25 15:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingbi

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-02-25 09:03:57
谢谢指点！请问你做过酵母破胞实验吗？能不能具体提供一些方法指导一下...

我做大肠杆菌超声破碎的，酵母表达多是分泌的，一不用。
但是既然你要用这个方法就按照细菌破碎的原则来试试，功率别太高，随时留样镜检破碎情况。破黑了原因都一样。
我的蛋白是包涵体，破碎时间长也不怕，你的是胞内表达吧，破碎久了怕蛋白有损失，所以也要随时留样检测，经过几轮尝试最后确定最佳破菌时间。
希望建议对你有用。
赞一下 回复此楼
17楼2014-02-26 12:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰艺于欣然

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-02-23 18:59:34
木有问题的，如果酵母表达的蛋白不需要活性检测什么的，600W木有问题的。如果需要后续的活性检测，建议功率适当降低 400w可以了。超声后离心有黑色物质也很正常，不用担心。至于超声的时间，看你超声的菌液量。一般 ...

为什么我超了很久很久还是一点都不清呢
赞一下 回复此楼
18楼2014-11-24 09:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱多龙

木虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2014-11-24 09:41:52
为什么我超了很久很久还是一点都不清呢...

超声很久还不清？是不是超声的体积太小，或者探头碰壁了啊？还是菌体太浓了？超声后离心看一看吧。
赞一下 回复此楼
19楼2014-11-24 20:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柳剑一1989

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好，我现在和你当时的情况差不多，整个实验室就我自己在做。我询问得知酸洗玻璃珠法提取酵母DNA比较好，但不知道怎么操作。能不能把操作步骤给说一下啊？？？？？万分感谢
赞一下 回复此楼
20楼2015-05-10 12:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘逸的云 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 11/550 2026-09-30 08:04 by xli1984
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭