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碱裂解法提取质粒时怎么减少RNA?
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铁虫
(小有名气)
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专业: 微生物资源与分类学
[
求助
]
碱裂解法提取质粒时怎么减少RNA?
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我想利用碱裂解法提取质粒送样测序,但是RNA特别条带特别亮,不知道怎么去除或者减少RNA,对测序有没有影响
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1楼
2014-02-21 17:03:50
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Neo2000
木虫
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2014-02-22 21:31:12
用试剂盒就好啦,花不了几个钱,或者在Solution I里加RNase A
[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼
2014-02-22 16:09:00
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shiyiyaya
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流
2014-02-22 21:30:58
RNA多还是会干扰测序的。办法就是提取质粒的过程中或之后加入RNase即可。
可购买粉末自己配制,也可直接购买溶液。
祝好!
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2楼
2014-02-21 17:21:48
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鬼羽帝魂
木虫
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专业: 生物物理、生物化学与分子
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最后溶解用TER溶解就好。
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3楼
2014-02-21 21:35:21
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意孤城_
金虫
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流
2014-02-22 21:31:03
将去RNA酶加到溶解buffer中,4度保存。每次溶解后在37度水浴半小时效果更好。为了确保去RNA酶中没有DNA酶,建议在溶解buffer加去RNA酶之前,将去RNA酶在沸水煮10分钟。
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4楼
2014-02-22 15:41:56
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