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shy529848788

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求pull-down筛选互作蛋白 已有3人参与

请问大家知道有关于用pull-down技术筛选互作蛋白的方法吗?注意是筛选互作蛋白哦,不是验证哦
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pureying

木虫 (正式写手)

你好,找到用pull-down技术筛选互作蛋白的方法了吗?我最近也要做这个实验,一直没有找到方法,方便加你?
5楼2017-05-28 16:37:23
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shiyiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-19 22:42:15
没有用过pull-down的方法去筛选。如果一定要用,或许可以使用半pull-down的方法,用一个纯化好的诱饵蛋白,和完全的细胞裂解液混合,Pull-down之后SDS-PAGE,再将条带取出打质谱。

目前筛选蛋白的相互作用有很多,条件允许可使用芯片,次之可以尝试酵母双杂交等等。

祝好运!
2楼2014-02-19 22:06:45
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yucheng9255

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
筛选互作蛋白用酵母双杂
3楼2014-02-20 00:23:49
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-30 11:30:53
可以的,不过要知道其中的一个蛋白,用它做诱饵拉蛋白,然后做质谱检测,也可以用免疫共沉淀的方法,不过拉下的蛋白,有可能不是直接相互作用
多情总被无情扰。。。愁
4楼2014-02-20 10:35:01
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