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章恺悦

禁言 (初入文坛)

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细胞实验操作

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gaohy555

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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6楼2014-12-31 09:33:56
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suqizhi

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
137167741: 金币+2, 小木虫交流,共同进步~~ 2014-01-23 19:58:09
silicare: 金币+11, BioEPI+1, 应助指数+1, 处女贴 2014-01-27 09:52:02
通常测定细胞的生长状况,可以有两种方法,
1) 对于悬浮细胞,不换液,直接在培养上清中,按照比例加入CCK-8, 培养一段时间即可,此时酚红的干扰几乎可以忽略不计,如果有不含细胞的孔,那么可以直接去除背景,所以问题不大。
2)对于贴壁细胞,建议先把培养基和CCK-8按照比例混合,然后换液培养,这样做的目的是,降低孔间加样的差异。

对于你这两种细胞的情况,
1)如果测定贴壁细胞的生长状况,那么可以把悬浮的T细胞转移掉,使用上述第二种方法测定。
2)如果T细胞对于间充质细胞的生长很关键,不能取走,那么测定的活性程度是总量,此时,需要对每一个孔的T细胞进行估算,如果每个培养条件下T细胞总量接近,或者T细胞含量很少,远远小于间充质细胞,也可以测定,使用对照孔可以去除T细胞的影响。
3)如果T细胞可以短时间内除去,可以找个灵敏度高的CCK-8,信号强,建议细胞量合适的情况下(每一个孔10000个),30分钟左右出读数结果,测定后,可以将T细胞再加入培养孔。 这样做对细胞的生长影响不大。但是如果做动力学,那么要考虑的因素多一些。

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2楼2014-01-23 15:00:54
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章恺悦

禁言 (初入文坛)

送红花一朵
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3楼2014-01-24 10:40:14
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treetreew

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
silicare: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励新虫发帖交流 2014-01-27 09:52:10
多设几组,用手数
4楼2014-01-24 11:35:57
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