应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何提高细胞原代培养细胞的产量？
141/1返回列表
查看: 2746  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

梁顺涛

金虫 (小有名气)

[交流] 如何提高细胞原代培养细胞的产量？

各位师兄师姐，我最近在做小鼠骨髓来源的巨噬细胞的体外分化，用含M-csf的DMEM(10%FBS)的培养基培养小鼠骨髓细胞，中间3天后换次液，7天后收集，但是每次收集的细胞数都不多，5只老鼠，最后也就手机6——7*10^6个/ML，请问该怎么处理才能提升细胞产量啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

巨噬细胞实验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-17 14:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a070274011

新虫 (初入文坛)
★ ★
梁顺涛(金币+1): 谢谢参与
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2014-01-26 20:29:25
原代培养最怕染菌，首先一定要做到无菌条件，取下的组织要依次经过酒精，含双抗缓冲液（PBS或D-HANKS），不含双抗缓冲液，漂洗数次。再者就是在剪碎组织时应该是越碎越好，一般要剪20-30分钟。最后就是培养液的PH一定要在所培养的细胞所需的范围内，原代一般加入20的血清（胎牛血清要好于小牛血清）。牛血清可以在中国实验室耗材网biolabware.cn购买
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-17 14:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)
★ ★
梁顺涛(金币+1): 谢谢参与
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2014-01-26 20:29:33
换液用的离心方法还是自然沉降？牛血清质量也很关键的。不一定大牌子的就好，得看你实际用下来的结果。一般15~20%牛血清。
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-17 15:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-01-26 20:29:43
引用回帖:
2楼: Originally posted by a070274011 at 2014-01-17 14:59:16
原代培养最怕染菌，首先一定要做到无菌条件，取下的组织要依次经过酒精，含双抗缓冲液（PBS或D-HANKS），不含双抗缓冲液，漂洗数次。再者就是在剪碎组织时应该是越碎越好，一般要剪20-30分钟。最后就是培养液的PH一 ...

放酒精里可以理解，但是用含双抗的缓冲液冲洗就没有必要了吧？双抗是通过阻断细菌增值而起作用的，用它漂洗短时间内是不是起不到抑菌的作用？要剪碎的组织能有多大？会用20到30分钟吗？这么长的时间细胞会不会死亡啊？
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-18 11:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2014-01-26 20:29:49
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-17 15:08:06
换液用的离心方法还是自然沉降？牛血清质量也很关键的。不一定大牌子的就好，得看你实际用下来的结果。一般15~20%牛血清。

谢谢啊!我在大皿里培养，换液时直接将原培养基弃掉，滴管吸PBS沿大皿内壁缓慢加入，然后“十”字形晃动培养皿弃掉PBS，重复2到3次，然后加上新的培养基，方法和加PBS一样。血清是进口FBS的，我用的浓度是10%。
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-18 11:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 梁顺涛 at 2014-01-18 11:41:55
谢谢啊!我在大皿里培养，换液时直接将原培养基弃掉，滴管吸PBS沿大皿内壁缓慢加入，然后“十”字形晃动培养皿弃掉PBS，重复2到3次，然后加上新的培养基，方法和加PBS一样。血清是进口FBS的，我用的浓度是10%。...

血清加到15%试试，换液时候要留一点时间让细胞沉一下，别晃完就倒了。
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-24 16:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-24 16:03:33
血清加到15%试试，换液时候要留一点时间让细胞沉一下，别晃完就倒了。...

嗯 ，好的 ，来年试试。
回复此楼
8楼2014-01-25 21:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

treetreew

木虫 (小有名气)
★
梁顺涛(金币+1): 谢谢参与
冲出来的？

好像差不多就这么多细胞，不算少了
赞一下 回复此楼
9楼2014-01-26 10:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by treetreew at 2014-01-26 10:08:39
冲出来的？

好像差不多就这么多细胞，不算少了

不多啊，老师说她以前做的时候，4只小鼠就能收获1-2*10^7个。
赞一下 回复此楼
10楼2014-01-27 00:28:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

treetreew

木虫 (小有名气)
我记得我冲出来是10的5次方数量级，一只老鼠，比你少多了
细胞够做实验就好，多了不见得是好事儿
赞一下 回复此楼
11楼2014-01-27 07:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by treetreew at 2014-01-27 07:23:05
我记得我冲出来是10的5次方数量级，一只老鼠，比你少多了
细胞够做实验就好，多了不见得是好事儿

我的是不够用，我的实验条件比较多，一次得用96孔板，每孔10的5次方个
赞一下 回复此楼
12楼2014-01-27 20:25:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梁顺涛

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by treetreew at 2014-01-27 07:23:05
我记得我冲出来是10的5次方数量级，一只老鼠，比你少多了
细胞够做实验就好，多了不见得是好事儿

你的肯定冲出来的少
赞一下 回复此楼
13楼2014-01-27 20:26:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我肚子好饿

禁虫 (初入文坛)
★
梁顺涛(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
14楼2018-10-29 20:25:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yingying15884楼
2014-01-17 21:27   回复  
梁顺涛(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 小满万安 的主题更新
141/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 4/200 2026-09-01 06:38 by o3EMxHUAQDtS
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 06:06 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 5/250 2026-09-01 05:45 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭