HPLC使用的小问题 - - 有奖问答中转子版 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

11楼2008-01-12 14:18:54

txy8469393

木虫 (小有名气)

拿着扫把的研究僧

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puege时不开阀会怎么样？跑样品时不关阀会怎样？
puege一般是用来快速填充流动相和排空管道的空气，HPLC长时间不用管道中会出现大量气泡，所以在使用前需要排气。因为puege走的是旁路，所以在进样时不关阀，样品就不会经过柱子。
同一样品在不同机子上出峰时间会由13分钟提前到6分钟吗？（柱子分别是4.6*25 10微米、4.6*20 5微米，都是碳18反相柱，流动相相同，温度不确定）
一般来说，只要条件相同，出峰应该基本相同，可能是因为你用的柱子变了，所以出峰时间才改变。

找我请打110,你别看我拿着扫把,其实我是弹吉他的!

12楼2008-01-13 11:14:57

shihy2007

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1）purge时不开阀会怎么样? 这是明显的违规操作,一般purge时流速比较大通常为5ml/min左右,不开阀流动相会流过柱子,这样就会使系统柱前压很大,柱前的某个接头会漏液(比较乐观的情况),这时候关上泵,拧紧接头,打开阀重新purge就可以了,没什么损失.如果柱前没漏液,这么大的压力全让柱子承担应该会报警的,没报警的话压力又大,哪么就恭喜你了,你可以换一根新柱子用了,这根完蛋了,这么大的压力全让柱子承担柱头一般会塌陷的.

2）跑样品时不关阀会怎样？跑样品时不关阀样品基本不会走,因为不关阀时流动相是流过purge时的流路而不经过柱子,由于经过柱子的流路压力比流过purge时的流路大的多,所以柱子的流路不通,而且进样阀在purge之后,所以进样后样品是不动的.

3）同一样品在不同机子上出峰时间会由13分钟提前到6分钟吗？（柱子分别是4.6*25 10微米、4.6*20 5微米，都是碳18反相柱，流动相相同，温度不确定）
这种情况完全有可能,问题不在机子上而在柱子上,这两种粒径的固定相的比表面积差别比较大

13楼2008-01-13 11:36:41

shihy2007

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前面的几位不要误导别人,出峰时间和压力没关系只和固定相,流动相,流速这三者有关.

14楼2008-01-13 11:40:10

shihy2007

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楼主有没有不用的废柱子啊,我做的课题就是做色谱固定相,然后自己装柱子考察性能,现在手头上就缺柱管.我可以用钱买,我的QQ是405020456.液相色谱方面的问题我基本上都可以解决.

15楼2008-01-13 11:46:50

zuishui001

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2）跑样品时不关阀会怎样？
进样品时不关阀应该不出峰,因为不关阀时流动相是流过purge时的流路进废液桶而不经过柱子，purge进样阀在进样前应该关闭,所以进样后样品是不动的.

3）同一样品在不同机子上出峰时间会由13分钟提前到6分钟吗？（柱子分别是4.6*25 10微米、4.6*20 5微米，都是碳18反相柱，流动相相同，温度不确定）
这种情况完全有可能,问题不在机子上而在柱子上,这两种粒径的固定相的比表面积差别比较大，只要出峰顺序＆比例不变应该就是正确地吧

16楼2008-01-13 16:53:40

sunnyjane

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puege时不开阀会柱压过高，损坏柱子和设备零件。跑样品时不关阀会检测不到样品，因为样品在进样环里不会被流动相带走，流动相都从purge阀流走了。
同一样品在不同机子上出峰时间会由13分钟提前到6分钟的。每个品牌的不同柱子，填充材料不一样，样品的保留就不一样，有这种可能。我有一个样品就曾加在一个柱子上12分钟，换了另外的柱子，就跑到7分钟。另外柱长也是很重要的影响因素。250和150的柱子时间肯定不一样。5微米和10微米的柱子填充材料大很多，压力很填充空隙都有很大差别，相差7分钟也不足为奇。不过要注意其他部件有没有异常。比如purge阀和pump的运行情况。

17楼2008-01-14 13:37:24