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急急急！！western 半干转膜屡次失败，求大神救命！已有5人参与
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最近做了4次western转膜，都失败了，求大神帮帮我吧~~快崩溃了~ 仪器：biorad semi-dry cell 目的蛋白：100KD左右，用的预染（30-230KD）marker，其中有一条80KD的红色marker。 问题：用的biorad的厚滤纸，师姐说中间还要加层薄滤纸，所以最中的三明治是厚海绵-薄滤纸-0.44 PVDF膜-薄滤纸-厚海绵，半干条件下15V，30min，看到大部分的条带都转到厚海绵上了，薄滤纸上很干净，膜上看不清条带，丽春红预染后看不见有什么条带。 后来又跑了一块胶，15V,20min，结果发现红色条带以上的都还在胶上，底部的厚海绵上仍旧可以看到模糊的marker条带。请问大神这是转过了，还是还没转上呢？前后就差10min，半干转的这么快吗？我们实验室师姐跑的40KD，同样仪器说是用了40min,为什么我这蛋白比较大反而转的比较快呢？实在想不明白~~ 本人菜鸟，许多条件都太熟，什么都得自己摸，求帮助呀  ~~ |
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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2014-01-12 07:49:13
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3楼2014-01-11 19:55:10
2楼2014-01-11 18:59:08
4楼2014-01-11 22:32:08
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silicare: 金币+3, 谢谢参与 2014-01-27 10:04:37
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5楼2014-01-11 23:47:22