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研究室新生

铜虫 (小有名气)

[求助] 大质粒转化 感受态细胞问题已有7人参与

最近做一个项目,酶切连接好的质粒大小在15kb左右,自己做的DH5a感受态细胞总是转不进去,对照显示DH5a感受态细胞是没问题的,有老师说是感受态细胞的问题,需要能够吸收大质粒的感受态细胞,但不知道什么样的感受态细胞能吸收大质粒啊~~~请教各位同学老师。
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人生是一棵不停生长的树。
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冰风颤木 at 2014-01-09 17:42:11
你说的转不进去 什么意思?是说转化子没有长出来吗?

是的啊~~
人生是一棵不停生长的树。
5楼2014-01-13 12:28:05
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 不叶珏 at 2014-01-09 15:52:42
15k一般是没问题的 做植物转基因的 空质粒都11k以上了

好的~~那我再多试试
人生是一棵不停生长的树。
6楼2014-01-13 12:29:52
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 冰风颤木 at 2014-01-13 15:00:39
感受态多做做吧 会长出来的 多看看感受态怎么做...

恩恩~~谢谢
人生是一棵不停生长的树。
8楼2014-01-15 14:01:57
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-15 17:18:49
如果热激法做不出来,可以试试电击转。

恩,好的,谢谢啊~~电转法要换感受态细胞,这个要领导同意了才能换~~~我先用热激法做做吧~~~
人生是一棵不停生长的树。
10楼2014-01-16 09:55:34
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铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-16 11:11:18
不客气。你也可以试试借别人的感受态做做看。...

谢谢~~~
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15楼2014-01-21 09:18:05
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 15879003030 at 2014-01-16 14:35:39
难道你感受态细胞都是买的?

不然电转的感受态自己随便做都能做好多...

自己做啦~~木经费~~你最大转过多大的质粒~~
人生是一棵不停生长的树。
16楼2014-01-21 09:19:06
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铜虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by liu3637287 at 2014-01-16 18:08:38
20kb-30kb都做过,没问题。还是要优化你的感受态细胞

也是DH5a感受态??求优化方法~~~
人生是一棵不停生长的树。
17楼2014-01-21 09:19:39
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by liu3637287 at 2014-01-21 11:26:29
电转化感受态细胞,总有一款适合你...

谢谢~
人生是一棵不停生长的树。
20楼2014-01-23 16:36:26
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研究室新生

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-21 15:11:30
恩啊...

谢谢大家。。已经做出来了。初步验证是正确的。。。送测序了~~~谢谢大家啦~~
人生是一棵不停生长的树。
21楼2014-01-23 16:37:17
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