应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » MTT法测细胞活力
51/1返回列表
查看: 2819  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)

[求助] MTT法测细胞活力 已有3人参与

本人现在用MTT法做测试食用菌液体菌种活力的实验，做下来发现各种各样的问题。请教下各位前辈，跪请帮助
首先有四个疑问，为什么MTT法生成的甲臜是蓝紫色结晶物质，可是检测波长却定在560或570nm（此波长下颜色是黄色和绿色），我做实验过程中产生不少黄色物质，蓝紫色物质不稳定，PS，我用异丙醇溶解MTTf。第二，产生的蓝紫色物质总是贴在塑料的离心管壁上，产生多贴得就多，我用的是可见紫外分光光度计做这个实验（实验室没有酶标仪），要取出溶解MTTF后的液体，这样造成很大的误差，要怎么才不会粘在管壁上。第三，MTT与菌体的反应温度真是让我抓狂，温度越高在560nm处测得的吸光值越高，在50摄氏度之前的温度下基本上没反应，之后温度越高产生的物质的吸光值越高。
跪求能人来解达，同道中人来探讨，感谢一万次。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验初步

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小硕毕业散户
1楼 2014-01-08 17:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-01-09 09:24:57
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时

谢谢。我也不知道为什么要这么高的温度。但实验结果就是这样。我的实验材料是食用菌液体菌种，可能是细胞壁和细菌不一样，有一篇文献说50摄氏度。贴壁的情况你没遇到吗？真奇怪，我自做这个实验以来，用的塑料离心管不管用什么方法上面的蓝紫色就是洗 不下来，超声啊、加热、振荡。您的管壁上真的没有颜色粘在上面？会不会是因为用的材料不一样，请问你用什么材料的管子。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
4楼2014-01-09 09:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lilanluo

金虫 (著名写手)
我知道颜色问题了，这是因为吸收波长在500－600被测溶液是蓝紫色，而且用不同溶剂波长不一样（这个和文献符合，做实验也可以验证），就是很难理解。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
2楼2014-01-08 21:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lilanluo: 金币+1, ★有帮助 2014-01-09 09:53:55
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-09 09:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lilanluo at 2014-01-09 09:53:42
谢谢。我也不知道为什么要这么高的温度。但实验结果就是这样。我的实验材料是食用菌液体菌种，可能是细胞壁和细菌不一样，有一篇文献说50摄氏度。贴壁的情况你没遇到吗？真奇怪，我自做这个实验以来，用的塑料离心 ...

我用MTT做的细胞，在细胞培养板里做的。
按照原理，是MTT和琥珀酸脱氢酶反应，所以温度不应该那么高
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-01-09 15:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭