应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » MTT法测细胞活力
51/1返回列表
查看: 3425  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)

[求助] MTT法测细胞活力 已有3人参与

本人现在用MTT法做测试食用菌液体菌种活力的实验，做下来发现各种各样的问题。请教下各位前辈，跪请帮助
首先有四个疑问，为什么MTT法生成的甲臜是蓝紫色结晶物质，可是检测波长却定在560或570nm（此波长下颜色是黄色和绿色），我做实验过程中产生不少黄色物质，蓝紫色物质不稳定，PS，我用异丙醇溶解MTTf。第二，产生的蓝紫色物质总是贴在塑料的离心管壁上，产生多贴得就多，我用的是可见紫外分光光度计做这个实验（实验室没有酶标仪），要取出溶解MTTF后的液体，这样造成很大的误差，要怎么才不会粘在管壁上。第三，MTT与菌体的反应温度真是让我抓狂，温度越高在560nm处测得的吸光值越高，在50摄氏度之前的温度下基本上没反应，之后温度越高产生的物质的吸光值越高。
跪求能人来解达，同道中人来探讨，感谢一万次。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验初步

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小硕毕业散户
1楼 2014-01-08 17:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lilanluo: 金币+1, ★有帮助 2014-01-09 09:53:55
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-09 09:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lilanluo

金虫 (著名写手)
我知道颜色问题了，这是因为吸收波长在500－600被测溶液是蓝紫色，而且用不同溶剂波长不一样（这个和文献符合，做实验也可以验证），就是很难理解。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
2楼2014-01-08 21:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-01-09 09:24:57
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时

谢谢。我也不知道为什么要这么高的温度。但实验结果就是这样。我的实验材料是食用菌液体菌种，可能是细胞壁和细菌不一样，有一篇文献说50摄氏度。贴壁的情况你没遇到吗？真奇怪，我自做这个实验以来，用的塑料离心管不管用什么方法上面的蓝紫色就是洗 不下来，超声啊、加热、振荡。您的管壁上真的没有颜色粘在上面？会不会是因为用的材料不一样，请问你用什么材料的管子。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
4楼2014-01-09 09:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lilanluo at 2014-01-09 09:53:42
谢谢。我也不知道为什么要这么高的温度。但实验结果就是这样。我的实验材料是食用菌液体菌种，可能是细胞壁和细菌不一样，有一篇文献说50摄氏度。贴壁的情况你没遇到吗？真奇怪，我自做这个实验以来，用的塑料离心 ...

我用MTT做的细胞，在细胞培养板里做的。
按照原理，是MTT和琥珀酸脱氢酶反应，所以温度不应该那么高
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-01-09 15:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 4/200 2026-09-01 06:38 by o3EMxHUAQDtS
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 5/250 2026-09-01 05:43 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭