应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » MTT法测细胞活力
51/1返回列表
查看: 3434  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)

[求助] MTT法测细胞活力 已有3人参与

本人现在用MTT法做测试食用菌液体菌种活力的实验，做下来发现各种各样的问题。请教下各位前辈，跪请帮助
首先有四个疑问，为什么MTT法生成的甲臜是蓝紫色结晶物质，可是检测波长却定在560或570nm（此波长下颜色是黄色和绿色），我做实验过程中产生不少黄色物质，蓝紫色物质不稳定，PS，我用异丙醇溶解MTTf。第二，产生的蓝紫色物质总是贴在塑料的离心管壁上，产生多贴得就多，我用的是可见紫外分光光度计做这个实验（实验室没有酶标仪），要取出溶解MTTF后的液体，这样造成很大的误差，要怎么才不会粘在管壁上。第三，MTT与菌体的反应温度真是让我抓狂，温度越高在560nm处测得的吸光值越高，在50摄氏度之前的温度下基本上没反应，之后温度越高产生的物质的吸光值越高。
跪求能人来解达，同道中人来探讨，感谢一万次。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验初步

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小硕毕业散户
1楼 2014-01-08 17:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)
现在做了个小实验，用大肠杆菌加MTT在37和50度下反应，同时灵芝菌液加MTT在50度下反应。结果很明显，大肠杆菌37度下反应1小时颜色是绿色的，不是纯的绿。灵芝菌在50度都没有什么颜色变化，还是MTT的颜色。
至于粘壁，大肠杆菌反应液在塑料离心管底部有一层紫色物质粘着，估计和我之前做的一样，弄不下来，时间短点可能就不会粘在上面了；大肠杆菌反应液在玻璃试管里没有那一层紫色的东东。
这就说明了，灵芝菌肯定不适合这样做，我认为是细胞壁的问题，估计要破壁才会有效果。
感谢各位的回答。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
10楼2014-01-12 17:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lilanluo

金虫 (著名写手)
我知道颜色问题了，这是因为吸收波长在500－600被测溶液是蓝紫色，而且用不同溶剂波长不一样（这个和文献符合，做实验也可以验证），就是很难理解。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
2楼2014-01-08 21:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lilanluo: 金币+1, ★有帮助 2014-01-09 09:53:55
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-09 09:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilanluo

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-01-09 09:24:57
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了
MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时

谢谢。我也不知道为什么要这么高的温度。但实验结果就是这样。我的实验材料是食用菌液体菌种，可能是细胞壁和细菌不一样，有一篇文献说50摄氏度。贴壁的情况你没遇到吗？真奇怪，我自做这个实验以来，用的塑料离心管不管用什么方法上面的蓝紫色就是洗 不下来，超声啊、加热、振荡。您的管壁上真的没有颜色粘在上面？会不会是因为用的材料不一样，请问你用什么材料的管子。
赞一下 回复此楼
小硕毕业散户
4楼2014-01-09 09:53:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭