应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带
51/1返回列表
查看: 1074  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带 已有1人参与

phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带。我重组成功的质粒在6kb左右，但是从观察看来没有重组成功。另外我用的限制酶是EcoRI与PstI，重组到pETDuet-1上，再化学转入JM110或者电转DH5a，老是不成功。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-05 17:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 00:53:16
是的。从你的电泳图上看，除了4条亮带以外，还有些其他的暗带。你可以调整曝光时间或者增加上样量，最好消化RNA后再跑电泳。...

谢谢啦
回复此楼
5楼2014-01-07 10:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-07 08:45:06
ruchang2013: 金币+5, ★★★很有帮助, 很满意，谢谢 2014-01-16 15:13:28
4条带分别在什么位置？不会是指gDNA和RNA吧。克隆不成功的问题一般是酶切不好，完全按照DNA用量和酶的效价建立酶切体系，应该成功率很高的。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-05 17:58:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-05 17:58:33
4条带分别在什么位置？不会是指gDNA和RNA吧。克隆不成功的问题一般是酶切不好，完全按照DNA用量和酶的效价建立酶切体系，应该成功率很高的。

这4条带是菌株本身的DNA或RNA？我这样认为对不？我的实验重组质粒如果转入成功，应该在pETDuet-1（5420）上面，重组成功的质粒大约在6400 bp
phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带
2014.01.05.png
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-06 16:10:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ruchang2013 at 2014-01-06 16:10:37
这4条带是菌株本身的DNA或RNA？我这样认为对不？我的实验重组质粒如果转入成功，应该在pETDuet-1（5420）上面，重组成功的质粒大约在6400 bp

2014.01.05.png
...

是的。从你的电泳图上看，除了4条亮带以外，还有些其他的暗带。你可以调整曝光时间或者增加上样量，最好消化RNA后再跑电泳。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-01-07 00:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +4 gouxfjh 2026-08-28 6/300 2026-08-29 07:15 by gouxfjh
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭