应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 952  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带 已有1人参与

phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带。我重组成功的质粒在6kb左右，但是从观察看来没有重组成功。另外我用的限制酶是EcoRI与PstI，重组到pETDuet-1上，再化学转入JM110或者电转DH5a，老是不成功。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-05 17:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-07 08:45:06
ruchang2013: 金币+5, ★★★很有帮助, 很满意，谢谢 2014-01-16 15:13:28
4条带分别在什么位置？不会是指gDNA和RNA吧。克隆不成功的问题一般是酶切不好，完全按照DNA用量和酶的效价建立酶切体系，应该成功率很高的。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-05 17:58:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-05 17:58:33
4条带分别在什么位置？不会是指gDNA和RNA吧。克隆不成功的问题一般是酶切不好，完全按照DNA用量和酶的效价建立酶切体系，应该成功率很高的。

这4条带是菌株本身的DNA或RNA？我这样认为对不？我的实验重组质粒如果转入成功，应该在pETDuet-1（5420）上面，重组成功的质粒大约在6400 bp
phenol chloroform提取质粒的电泳图是不是不管成功与否，都会出现必定出现的4条带
2014.01.05.png
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-06 16:10:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ruchang2013 at 2014-01-06 16:10:37
这4条带是菌株本身的DNA或RNA？我这样认为对不？我的实验重组质粒如果转入成功，应该在pETDuet-1（5420）上面，重组成功的质粒大约在6400 bp

2014.01.05.png
...

是的。从你的电泳图上看，除了4条亮带以外，还有些其他的暗带。你可以调整曝光时间或者增加上样量，最好消化RNA后再跑电泳。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-01-07 00:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 00:53:16
是的。从你的电泳图上看，除了4条亮带以外，还有些其他的暗带。你可以调整曝光时间或者增加上样量，最好消化RNA后再跑电泳。...

谢谢啦
回复此楼
5楼2014-01-07 10:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ruchang2013 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:40 by 1018329917
[考研] 275求调剂 +11 Micky11223 2026-03-25 16/800 2026-03-29 14:27 by 1018329917
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 材料与化工272求调剂 +9 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 9/450 2026-03-28 15:21 by 1018329917
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭