| 查看: 2352 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
大肠杆菌RNA提取求大虾帮忙 已有2人参与
|
|||
|
本人要提取大肠杆菌的RNA做荧光定量PCR，本以为大肠的很好提，没想到提了1个多月也没有好结果，求指导！！！拜谢啊 我的问题如下： 1 菌液量如何控制，有报道说要10 +7数量级的细胞，可是1od菌浓度就已经10 +8数量级了吧？难道1OD的菌液就要稀释10倍？我稀释以后菌量很少 根本提不出来，应该怎么去菌液呢？麻烦大虾指导清楚点，一般OD多少菌液取多少毫升，加多少Trizol？ 2 加Trizol要反复吹打吗？静置多久合适？ 3 加异丙醇后需要静置吗？多久合适？其实我没静置时也有提出来过，见图，只是降解严重也有DNA污染，会不会不静置沉淀不充分呢？ 4 我发现用试管的菌液提取相对容易，而我转摇瓶发酵后就很难提取出来RNA了，取样也处于生长期的菌体，这个是什么问题呢？？？ 图中是我提的试管培养12小时的菌液，没稀释，还能出现条带，发酵的菌液根本提不出来，一条带也没有，到底怎么回事呢。。。  11.21.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
291分调剂
已经有9人回复
-
调剂求收留
已经有34人回复
-
291 求调剂
已经有38人回复
-
22408 312求调剂
已经有17人回复
-
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有6人回复
-
290调剂生物0860
已经有41人回复
-
291求调剂
已经有3人回复
-
211本科材料化工求调剂
已经有23人回复
-
山东省基金2026
已经有9人回复
-
药学求调剂
已经有13人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于稀有密码子的优化，请求大家指教
已经有16人回复
- 【求助/交流】培养细胞的大虾来帮帮忙！尼日利亚菌素的使用
已经有5人回复
yangpanfei
禁虫 (正式写手)
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2014-01-07 15:04:52
eagles123
金虫 (正式写手)
- MicEPI: 1
- 应助: 154 (高中生)
- 金币: 5854.4
- 散金: 1607
- 红花: 12
- 帖子: 667
- 在线: 700.7小时
- 虫号: 322286
- 注册: 2007-03-11
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2014-01-05 11:04:12
3楼2014-01-05 12:04:30
yangpanfei
禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2014-01-07 11:52:53
