24小时热门版块排行榜    

查看: 1562  |  回复: 15

15195997166

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 本田透1990 at 2014-01-06 16:20:50
用随机引物,做tailPCR

能说具体点吗 不太懂 这个引物怎么设计
简单而快乐
11楼2014-01-06 18:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 15195997166 at 2014-01-06 10:08:06
恩 我现在是要对未知序列的基因片段进行扩增,我也找了别的属的这个基因 然后进行比对找出保守序列 但是比对结果不是很好 设计了一个对简并引物 但是结果最终没有扩出来 哎 现在正在郁闷中 想问问 你有什么好的建议...

合成引物之前验证了引物没有?跑了梯度PCR?各种调整一下PCR的条件,退货温度啊时间啊,延伸时间啊什么的
12楼2014-01-06 20:49:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15195997166

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by achonghello at 2014-01-06 20:49:29
合成引物之前验证了引物没有?跑了梯度PCR?各种调整一下PCR的条件,退货温度啊时间啊,延伸时间啊什么的...

跑了梯度pcr 也用软件验证了的呢主要就是退火温度吧 延伸时间应该影响不大吧
简单而快乐
13楼2014-01-06 21:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

内容已删除
14楼2014-01-06 21:58:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15195997166

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by achonghello at 2014-01-06 21:58:41
循环外面的那个延伸时间也稍微有点影响吧,我之前做的时候第一次用的是5min,跑不出来,后面弄10min就出来啦。。。不过你也可以换换模板试试看...

我用的就是十分钟 模板之前进行了跑胶验证是有dna的 而且我同时做了好几个模板
简单而快乐
15楼2014-01-07 09:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyl121

新虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 15195997166 at 2014-01-06 10:08:30

楼主,不好意思,我也是没看出要点在哪?呵呵,你可以跟3楼说的一样,那样挺好的;或者是你比对的,找出几个保守的碱基,然后加简并的,看你的大小,最好是18bp以上,要不引物多态性会很高
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
16楼2014-01-07 10:39:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 15195997166 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂; 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[教师之家] 版面费该交吗 +15 苹果在哪里 2026-02-22 18/900 2026-02-28 18:20 by mibaomingg
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见