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如何提取细胞中的线粒体? 已有4人参与
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求助细胞中线粒体的提取方法。查了下资料,看到好几种说法: ①直接套用组织中线粒体的提取方法:胰酶消化后得细胞,加入分离介质(250mM蔗糖,1mM EDTA,10mM tris-Hcl),于匀浆器中制成匀浆,在4℃离心机中1000g 离心10min后,弃沉淀,收集上清;再以12000g离心,15min后弃上清,收集沉淀,用分离介质将沉淀悬浮,重复12000g离心,15min后收集沉淀得到线粒体。 ②细胞弃去培养液后,用细胞收集液作用2到3分钟,用scraper,将细胞收集起来,6000g,离心15分钟。弃上清,之后加细胞匀浆液,用匀浆器或手动匀浆管匀浆,之后按要求离心。 那么请问细胞收集液指的是什么?细胞匀浆液指的是什么? ③超声提取 这个可以吗? |
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