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liulugang

木虫 (小有名气)

[求助] 提出的质粒跑胶大小偏差严重,单切后跑胶大小正常,请问这现象正常吗? 已有3人参与

刚提出的PKD46质粒,跑胶大小超10000bp,单切后再次跑胶条带位置在6329 bp附近。请问这样的正常现象是否正常。谢谢啦。。
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huoyongting

金虫 (正式写手)

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-03 09:46:01
liulugang: 金币+1, 有帮助 2014-01-04 17:05:04
一般提质粒大部分是超螺旋,跑出的条带都会比理论大小的小的,你这个大了难道都是开环的,不太可能吧,是不是跑胶的问题
2楼2014-01-02 16:59:50
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liulugang: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-04 17:04:24
这很正常!

楼主继续后面实验吧
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
3楼2014-01-02 17:57:28
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-03 09:46:05
liulugang: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-04 17:04:56
这个很正常,我们平常用的Marker都是线性化的,而提取的质粒不是,所以,如果你不确定的话,可以单酶切一下,在跑电泳(注意酶切时间),这样就能得出较准确地结果
4楼2014-01-02 21:46:16
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lihongyou000

铁虫 (正式写手)

楼主,您好!我最近提质粒也遇见和你类似的情况,提出的质粒跑胶后比预期大很多!请问楼主,你用这样的质粒做了后续实验没,对后续实验有影响不?期待楼主的回复。先谢过楼主了!
5楼2014-07-18 18:18:39
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卡卡罗特zxg

金虫 (小有名气)

我也做过这个电泳,结果总是小于6300bp,只有3000多bp,个人觉得6300bp为线性,应该分子量最大的了,10000多bp的话不理解了。
6楼2015-05-19 16:34:36
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