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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 反转录PCR一直P不出来，求助
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koko8001

新虫 (初入文坛)

[求助] 反转录PCR一直P不出来，求助 已有3人参与

我想P一个真核蛋白的基因，就直接反转了总RNA，然后进行PCR，如果只进行其中一小段的荧光定量PCR，显示目的基因中的一段是有的，但是想用引物将整个编码序列P下来却一直失败，求助各位该怎么办
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1楼 2014-01-01 19:51:19
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-02 08:33:38
koko8001: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-01-02 10:59:27
是不是整条目的带已经被分解了 成了几条小带  而反转录的时候  刚好转录了你的那条小带 所以又那一小段目的基因 个人认为
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生命不息奋斗不止
2楼2014-01-01 23:40:05
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koko8001

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2014-01-01 23:40:05
是不是整条目的带已经被分解了 成了几条小带  而反转录的时候  刚好转录了你的那条小带 所以又那一小段目的基因 个人认为

我也有这么猜测过，那该如何将整段P下来呢，真心求教
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3楼2014-01-02 10:48:41
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by koko8001 at 2014-01-02 10:48:41
我也有这么猜测过，那该如何将整段P下来呢，真心求教...

楼主可以去查一下引物是否合适 网上有的 我还没有做到这一步 实在不行 楼主如果样品不紧缺的话 在提取一次吧 检测一下吧
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生命不息奋斗不止
4楼2014-01-02 12:17:19
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by koko8001 at 2014-01-02 10:48:41
我也有这么猜测过，那该如何将整段P下来呢，真心求教...

楼主 如果P出来了 请告诉我 学习学习
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生命不息奋斗不止
5楼2014-01-03 14:09:28
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lihaokkkk

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我不想打击你
我认为时候未到，，，
你等春天了，下雨的日子，肯定能解决问题
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6楼2014-01-03 16:02:27
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你的引物设计有问题？PCR的条件优化没有?
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生而不息，奋斗不止！
7楼2014-01-03 16:12:48
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