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season131124

铁虫 (小有名气)

[求助] 用什么方法才能将多糖经过DEAE-52后收集到的组分中的盐离子除干净？？？ 已有5人参与

本人提取的一种植物多糖，经过DEAE-52用的0.05、0.1、0.2、0.3、0.5M 的NaCl洗脱后，将各组分收集浓缩后，想把盐离子脱掉后，进行干燥后做细胞实验。查文献后发现，大部分人都用透析的方法除盐，但是我将我的样品浓缩后，用截流量3000的透析袋蒸馏水透析3d，隔12h换一次水，用AgNO3检测不到Cl离子，但是冻干后，发现还是含有盐离子。后面也尝试延长透析的时间，但是感觉盐离子还是没有除干净。因为打算做细胞实验，担心样品中的盐离子对细胞活性有影响，所以请教各位，一般怎样才能将盐离子除干净呢？？？

我看文献中也有人用超滤膜除盐离子的，不知道效果怎么样？

因为后期要做细胞实验，所以对样品要求比较高，请各位大侠给些好的意见，谢谢~~~
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Everything is possible!
1楼 2013-12-21 15:47:33
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chong//虫

铜虫 (小有名气)
想问下楼主的问题解决没有，我也正愁用什么呢？不知道楼主能否分享下，谢谢
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2楼2013-12-22 21:21:22
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season131124

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chong//虫 at 2013-12-22 21:21:22
想问下楼主的问题解决没有，我也正愁用什么呢？不知道楼主能否分享下，谢谢

还没有呢，这几天要忙一点别的事情，只能等空闲点了继续查资料了
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Everything is possible!
3楼2013-12-22 21:39:44
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zengxr

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你的料液里面含的是NaCl的话可以用纳滤膜完全去除。
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4楼2013-12-25 14:59:00
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lincyb

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以用透析袋透析
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5楼2014-06-15 10:39:55
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

葡聚糖 sephadex G-100或者G-200柱层析
保证有效
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6楼2014-06-17 11:41:14
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fengzshang

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

盐离子有两种可能性，一个是你洗脱的NaCl没有透析干净，另外就是多糖本身含有金属离子。一般是用透析，当然如果是不行的话也可以用柱子层析，有专门的柱子，比如楼上提到的，还有PD-10交换柱。但这些柱子都只能脱去游离的盐，如果金属离子是和多糖螯合的话，用这个方法是除不去的
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7楼2014-07-14 15:53:04
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xiuwei001

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不知道你的多糖分子量多大
我们做蛋白质盐析的时候常用超滤管 3kd的除盐
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8楼2015-02-25 11:43:47
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season131124

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiuwei001 at 2015-02-25 11:43:47
不知道你的多糖分子量多大
我们做蛋白质盐析的时候常用超滤管 3kd的除盐

我的分子量一般有100kD左右，你用超滤管时，会不会导致样品吸附，损失很多样品？
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Everything is possible!
9楼2015-07-15 16:32:28
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