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柠檬可乐星新虫 (小有名气)
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使用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR，退火温度设定为多少啊？ 已有2人参与
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我要做克隆，载体是pMD 19-T，准备用M13F(-47)/M13R(-48)做菌落PCR，看引物合成单上给出的Tm值分别是65.52/56.98。以前听说一对引物Tm值相差最好不要超过5，为什么这对查这么多，是正常的吗？另外，实际做PCR时，退火温度设定为多少合适呢？ 有做过的高手 求指点 |
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