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吴迪2011

银虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
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帖子: 65
在线: 19.1小时
虫号: 1509249

[交流] 多肽紫外检测波长的选择问题

想问一下大家，在做多肽的分离纯化过程中紫外检测选择的波长是多少？214nm还是280nm?原因是什么？

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1楼 2013-12-16 17:56:47

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wangkaikaifh

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 2650504

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zybpxy: 金币+2, 鼓励新虫发帖 2013-12-17 09:40:41

可以做个全波长扫描看以下的，有的用的是220nm 的，不同的多肽所选择的波长是不一样的。

波长扫描的原理就是在一个波长范围内，对样品进行测量，反映的是样品在不同波长下的吸光度值。操作时需设定测量方式，即测定的是T还是A，然后是测量范围，样品的测定范围，然后是扫描波长，设定样品需要扫描的波长范围是从哪儿到哪儿。其次有扫描间隔，扫描间隔指的是仪器每隔多少纳米对样品进行测量，比如1nm为扫描间隔，则仪器从设定的起始波长开始，每隔1nm对样品进行取值，然后将各点连起来就是所需的图象。扫描速度有快中慢三种，这个可以根据所需设定，当然越慢越好。剩下的有扫描次数，指的是对样品进行1次或多次扫描。扫描后图象有重叠或覆盖两种方式，当扫描次数为2次以上时，覆盖则只显示最后一次扫描的图象，重叠则每次扫描的图象都在图象上显示。设定好后，将参比放在光路上进行基线校正，就是在所测的波长范围内每个波长上进行调满度，然后拉到样品上开始测量就好了。