应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌DNA提取
53/1返回列表
查看: 1693  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

love_糖糖

金虫 (正式写手)

[求助] 真菌DNA提取 已有3人参与

我用液氮研磨法提取曲霉DNA提了几次都没提出来，个人认为应该不难啊，不知道哪个步骤操作不当？我用的是天根的植物试剂盒，液体培养的，按照操作步骤一次也没成功，跑电泳根本就看不到带，各位大侠有什么好的建议么？跪谢了先。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2013-12-13 11:46:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1095314666

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by love_糖糖 at 2013-12-17 19:23:40
我是按照试剂盒的操作步骤来的，大体是这样：
1．取菌丝体放进研钵加入液氮充分碾磨。
2．将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μl 65℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒 ...

你这个是试剂盒的操作方法，我们做的时候对这个有改动，在2步时候加入巯基乙醇，目的是去色素，在第10步，我们是每次加50微升，放置2min后离心，这样做两次，不知道你在要求的提取液中有没有加乙醇，还有在研磨的时候你是用菌丝，还是液体培养的菌丝球，还有你的菌丝或者菌丝球干燥程度。
赞一下 回复此楼
路在脚下。
21楼2013-12-18 16:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
love_糖糖: 金币+1, ★有帮助 2013-12-14 20:43:53
霉菌的话通常是平板上培养吧，取菌的丝状体或子实体提取，一般酵母才直接液体提！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-12-13 12:33:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
love_糖糖: 金币+2, ★有帮助 2013-12-14 20:43:07
国产试剂盒效果一般都不怎么好。所以你得先加液氮研磨成菌粉再使用试剂盒提基因组。国外有比较好的试剂盒，从平板上挂下菌丝就能直接提取，但是好贵，50次2k多
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-13 13:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_糖糖

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 肥猫p at 2013-12-13 13:31:18
国产试剂盒效果一般都不怎么好。所以你得先加液氮研磨成菌粉再使用试剂盒提基因组。国外有比较好的试剂盒，从平板上挂下菌丝就能直接提取，但是好贵，50次2k多

国外的试剂盒我就不指望了，老板不乐意给买。只是不明白为什么一点都提不出来，真是急死了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-13 14:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭