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liming82101920金虫 (小有名气)
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[求助]
请教 SMARTer RACE的几个问题
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大侠们，最近在看SMARTer RACE的说明书，几个问题不明白啊，困惑，特来求助： 1. SMATer技术据说其SMARTer引物以及CDS引物中都包含了Sif I的酶切位点GGCCXXXXXGGCC，我找了半天怎么没找到？ 2.5‘race中合成了cDNA第一链时，在第一链的3’端已经并入了SMARTer IIA的互补序列，那么在后续的第二链合成中为什么不继续使用引导合成，而是使用了包含SMARTer IIA的LongUP引物？然后在得到完整的cDNA双链后的扩增过程中为什么又将LongUP引物又改成了ShortUP？因为我觉得用SMARTer IIA或者继续使用LongUP引物与GSP1搭配就能实现目的片段的大量扩增啊？百思不解，请高手们解疑。 |
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liming82101920
金虫 (小有名气)
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