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yyll1988

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
574759350: 金币+2, 有帮助 2013-12-05 15:26:14
不同的蛋白一般需要用不同的条件,我一般都是23℃,140rpm,1mM ITPG, 不行的话就只能做剃度了。低温低转速貌似可以降低一部分包涵体的产生。
11楼2013-12-05 08:59:17
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
574759350: 金币+2, 有帮助 2013-12-05 15:26:25
引用回帖:
10楼: Originally posted by 574759350 at 2013-12-05 08:17:49
如果说28℃诱导20h的话会不会蛋白发生降解?...

这个?这个每个蛋白情况不一样吧?不知道你的具体是什么蛋白,一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件,一般都是要先试条件的

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
12楼2013-12-05 12:38:02
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574759350

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-05 12:38:02
这个?这个每个蛋白情况不一样吧?不知道你的具体是什么蛋白,一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件,一般都是要先试条件的
...

我的是脂肪酶,在28℃诱导了20h,不知道会不会降解,我做做试试吧
13楼2013-12-05 15:25:58
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们是16度  IPTG 0.5mM  仅供参考   你可以做个梯度的
14楼2013-12-05 16:04:55
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晗笑珊珊

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by clcl88 at 2013-12-04 12:44:41
我们一般是16℃,过夜。IPTG0.5mM

请问16摄氏度摇菌,细菌会不会死?我今天加了IPTG摇菌几个小时后发现细菌死了。
15楼2014-08-29 22:37:04
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Ailly950

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

好久的贴了,最近在做这个实验,看了上面的讨论有所收获,谢谢~~希望质粒顺利表达~~~
16楼2015-03-15 19:18:26
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Marquis G

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-05 12:38:02
这个?这个每个蛋白情况不一样吧?不知道你的具体是什么蛋白,一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件,一般都是要先试条件的
...

请问讲解没
17楼2016-11-10 08:53:43
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