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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 低温诱导蛋白表达时用多少度合适？
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yyll1988

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
574759350: 金币+2, ★有帮助 2013-12-05 15:26:14
不同的蛋白一般需要用不同的条件，我一般都是23℃，140rpm，1mM ITPG， 不行的话就只能做剃度了。低温低转速貌似可以降低一部分包涵体的产生。
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11楼2013-12-05 08:59:17
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
574759350: 金币+2, ★有帮助 2013-12-05 15:26:25
引用回帖:
10楼: Originally posted by 574759350 at 2013-12-05 08:17:49
如果说28℃诱导20h的话会不会蛋白发生降解？...

这个？这个每个蛋白情况不一样吧？不知道你的具体是什么蛋白，一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件，一般都是要先试条件的

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
12楼2013-12-05 12:38:02
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574759350

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-05 12:38:02
这个？这个每个蛋白情况不一样吧？不知道你的具体是什么蛋白，一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件，一般都是要先试条件的
...

我的是脂肪酶，在28℃诱导了20h，不知道会不会降解，我做做试试吧
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13楼2013-12-05 15:25:58
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们是16度  IPTG 0.5mM  仅供参考   你可以做个梯度的
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14楼2013-12-05 16:04:55
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晗笑珊珊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by clcl88 at 2013-12-04 12:44:41
我们一般是16℃，过夜。IPTG0.5mM

请问16摄氏度摇菌，细菌会不会死？我今天加了IPTG摇菌几个小时后发现细菌死了。
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15楼2014-08-29 22:37:04
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Ailly950

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

好久的贴了，最近在做这个实验，看了上面的讨论有所收获，谢谢~~希望质粒顺利表达~~~
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16楼2015-03-15 19:18:26
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Marquis G

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-05 12:38:02
这个？这个每个蛋白情况不一样吧？不知道你的具体是什么蛋白，一般一个蛋白如何实验室没有已知的诱导条件，一般都是要先试条件的
...

请问讲解没
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17楼2016-11-10 08:53:43
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