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XhoI和NcoI双酶切之后连接转化不长克隆
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| 你们好，我想请教个问题，我用的载体是pBac5，用NcoI和XhoI37℃进行双酶切（做过3次，2次过夜，一次6h），之后胶回收，目的片段是有酶切位点的退火形成的双链，之后连接，用过载体和目的片段为1:3、1:4、1:5、1:6、1:7.5、3:3、2:3的体系连接，目的片段只有50bp，只长过一次，之后再也没长过克隆是怎么回事呢？？请高手请教，谢谢！！非常的着急！！！ |
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