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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求钙调蛋白CLM3用HIS标签的纯化protocol
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千年一雨

木虫 (正式写手)

[求助] 求钙调蛋白CLM3用HIS标签的纯化protocol 已有1人参与

如题，最近做钙调蛋白，想用HIS标签纯化，把基因克隆到PET28表达载体上，用大肠杆菌BL21表达后，不知道怎么纯化，相求问一下，有没有人有经验，用HIS标签过NI柱纯化过这个钙调蛋白？
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1楼 2013-11-22 10:26:30
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-22 14:26:39
Protocol蛋白质纯化步骤
http://wenku.baidu.com/view/1e099fc308a1284ac85043e7.html
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4楼2013-11-22 14:20:03
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同东中郎将

新虫 (小有名气)
过NI柱纯化，站里有NI柱纯化的册子，搜一搜都是，很基本的。
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曾子曰：“士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎？死而后已，不亦远乎？”
2楼2013-11-22 11:17:20
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11313135

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-22 14:26:32
晚上回去把我这边的纯化protocol发给你。
可以根据你的蛋白要求选择：咪唑洗脱，或者梯度PH洗脱。
分别适用于可溶蛋白和包含体蛋白。
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上海凯靖生物
3楼2013-11-22 13:36:35
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千年一雨

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 11313135 at 2013-11-22 13:36:35
晚上回去把我这边的纯化protocol发给你。
可以根据你的蛋白要求选择：咪唑洗脱，或者梯度PH洗脱。
分别适用于可溶蛋白和包含体蛋白。

anly@qibebt.ac.cn
Many thanks
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5楼2013-11-22 20:31:05
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