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千年一雨

木虫 (正式写手)

[求助] 求钙调蛋白CLM3用HIS标签的纯化protocol 已有1人参与

如题,最近做钙调蛋白,想用HIS标签纯化,把基因克隆到PET28表达载体上,用大肠杆菌BL21表达后,不知道怎么纯化,相求问一下,有没有人有经验,用HIS标签过NI柱纯化过这个钙调蛋白?
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-22 14:26:39
4楼2013-11-22 14:20:03
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

过NI柱纯化,站里有NI柱纯化的册子,搜一搜都是,很基本的。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-11-22 11:17:20
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11313135

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-22 14:26:32
晚上回去把我这边的纯化protocol发给你。
可以根据你的蛋白要求选择:咪唑洗脱,或者梯度PH洗脱。
分别适用于可溶蛋白和包含体蛋白。
上海凯靖生物
3楼2013-11-22 13:36:35
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千年一雨

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 11313135 at 2013-11-22 13:36:35
晚上回去把我这边的纯化protocol发给你。
可以根据你的蛋白要求选择:咪唑洗脱,或者梯度PH洗脱。
分别适用于可溶蛋白和包含体蛋白。

anly@qibebt.ac.cn
Many thanks
5楼2013-11-22 20:31:05
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