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maomaochongk

新虫 (初入文坛)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，

做了一个小分子的电泳，海洋酵母的，marker还可以，不知道为什么样品，特点是小分子特别差，是不是盐分高了？方法是按照nature的方法做的，还是有别的原因，谢谢大家啊。。。。。
Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，
未标题-1.jpg
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1楼 2013-11-19 17:21:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-20 10:32:24
上样量太高，变性不充分。不清楚你的样品的buffer, 不过浓度过高的盐对普通SDS-PAGE也有很大影响。
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3楼2013-11-20 04:14:54
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牧炀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-20 10:32:20
你把分离胶的浓度往小了调...而且你这块胶凝的时间估计是短了就马上上样了。顺便做个梯度加样吧  样品量有点多
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2楼2013-11-19 22:58:14
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maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 牧炀 at 2013-11-19 22:58:14
你把分离胶的浓度往小了调...而且你这块胶凝的时间估计是短了就马上上样了。顺便做个梯度加样吧  样品量有点多

谢谢牧炀的意见。
分离胶的浓度具体调多少，根据你的经验，多谢
第一天制胶，第二天才上的样，胶的凝固应该可以
加样我减少一下吧
多谢啊。。。。。
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4楼2013-11-20 15:18:54
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maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-20 04:14:54
上样量太高，变性不充分。不清楚你的样品的buffer, 不过浓度过高的盐对普通SDS-PAGE也有很大影响。

哦，我减少上样量试试
变性的话，是按照nature上说的37 °C for 15 min or for up to 60 min，还是煮沸3-5min啊？
我的上样buffer就是nature文献上的，我指的是我的样品是海洋材料，是不是样品中的盐分有点高啊。
谢谢你的建议。
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5楼2013-11-20 15:35:41
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