应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，
161/2返回列表12下一页
查看: 3344  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

maomaochongk

新虫 (初入文坛)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，

做了一个小分子的电泳，海洋酵母的，marker还可以，不知道为什么样品，特点是小分子特别差，是不是盐分高了？方法是按照nature的方法做的，还是有别的原因，谢谢大家啊。。。。。
Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，
未标题-1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-19 17:21:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-20 10:32:24
上样量太高，变性不充分。不清楚你的样品的buffer, 不过浓度过高的盐对普通SDS-PAGE也有很大影响。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-11-20 04:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

牧炀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-20 10:32:20
你把分离胶的浓度往小了调...而且你这块胶凝的时间估计是短了就马上上样了。顺便做个梯度加样吧  样品量有点多
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-19 22:58:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 牧炀 at 2013-11-19 22:58:14
你把分离胶的浓度往小了调...而且你这块胶凝的时间估计是短了就马上上样了。顺便做个梯度加样吧  样品量有点多

谢谢牧炀的意见。
分离胶的浓度具体调多少，根据你的经验，多谢
第一天制胶，第二天才上的样，胶的凝固应该可以
加样我减少一下吧
多谢啊。。。。。
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-20 15:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-20 04:14:54
上样量太高，变性不充分。不清楚你的样品的buffer, 不过浓度过高的盐对普通SDS-PAGE也有很大影响。

哦，我减少上样量试试
变性的话，是按照nature上说的37 °C for 15 min or for up to 60 min，还是煮沸3-5min啊？
我的上样buffer就是nature文献上的，我指的是我的样品是海洋材料，是不是样品中的盐分有点高啊。
谢谢你的建议。
赞一下 回复此楼
5楼2013-11-20 15:35:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牧炀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by maomaochongk at 2013-11-20 15:18:54
谢谢牧炀的意见。
分离胶的浓度具体调多少，根据你的经验，多谢
第一天制胶，第二天才上的样，胶的凝固应该可以
加样我减少一下吧
多谢啊。。。。。...

我之前跑的时候大概都是1.5%这样的幅度下调的  胶我很少用过夜冷藏的  你试下胶凝完半小时后就上样跑下  因为你的图上条带扭曲的总觉的是因为胶中间凝的不是很好导致的  上样量可以考虑减少一半  我是做海洋生物的血红蛋白的  变性选择煮沸五分钟的  上样减少的话  增加样品缓冲液的比例就好  不然到时候条带也会看不出来的
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-20 20:44:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 牧炀 at 2013-11-20 20:44:36
我之前跑的时候大概都是1.5%这样的幅度下调的  胶我很少用过夜冷藏的  你试下胶凝完半小时后就上样跑下  因为你的图上条带扭曲的总觉的是因为胶中间凝的不是很好导致的  上样量可以考虑减少一半  我是做海洋生物的 ...

谢谢。。。。
我再试一下，减少上样量
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-20 21:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by maomaochongk at 2013-11-20 15:35:41
哦，我减少上样量试试
变性的话，是按照nature上说的37 °C for 15 min or for up to 60 min，还是煮沸3-5min啊？
我的上样buffer就是nature文献上的，我指的是我的样品是海洋材料，是不是样品中的盐分有点高啊。 ...

是什么材料部重要，主要看你提取蛋白样品的缓冲液里的成分。煮沸对膜蛋白变性不好，容易聚集。可溶蛋白的话可以煮沸。
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-21 06:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉也是制样的问题，建议充分变性试试看。另外上样前试着离心一下，取上清点样。还有电泳过程中注意低温。
赞一下 回复此楼
小兵一个
9楼2013-11-21 08:42:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maomaochongk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-21 06:45:16
是什么材料部重要，主要看你提取蛋白样品的缓冲液里的成分。煮沸对膜蛋白变性不好，容易聚集。可溶蛋白的话可以煮沸。...

哦，多谢，长见识不少
我的样品是乙醇沉淀后，0.01 M的 Tris-HCl （pH8.6）溶解的，不知道影响大不大？多谢 cicelyzh的指点。。。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-11-22 08:50:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 maomaochongk 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-02 22:50 by rM1TE0WVDIIY
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 3/150 2026-09-02 22:50 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +14 Kittylucky 2026-08-27 15/750 2026-09-02 19:35 by liumei0601
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭