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关于PCR产物的几个问题
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1.我PCR体系配完以后，如果不立即进行PCR的话，应该放在4度还是-20度进行保存？最多能保存多长时间？为什么？ 2.我做完PCR以后，如果PCR产物不立即进行检测，PCR产物应放4度还是-20度进行保存？最多能保存多长时间？为什么？ 3.如果我在PCR产物中点上loading buffer，并不立即进行检测，应放哪个温度进行保存？最多能保存多长时间？为什么？ 4.如果我用的是MIX体系配的PCR，那么跑聚丙烯酰胺的话，上样的时候是否要点上样缓冲液。MIX是康博公司生产的。 谢谢 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的精彩。 2013-11-16 13:55:17
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的精彩。 2013-11-16 13:55:17
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第一个问题，应该放在-20那样的话保存的时间长一些，低温抑制酶的反应活性，要是加完酶没具体试过能保存多长时间，但是一两天应该是没有问题的，放4度的话估计也就半天。 第二，产物两者都可以，放在4度的一般仅可以保存4,5天，因为PCR反应中的一些物质会影响DNA的保存，放在-20的话保存一个月应该是肯定没问题的，建议-20保存 第三，加完loading buffer也建议放在-20loading buffer的成分主要是甘油和蔗糖主要目的是染色和沉淀DNA的所以和保存产物的应该一样 第四个没有具体做过，但是觉得应该是需要加上样缓冲液的 一般都建议-20保存，可以更长时间的保存 |
2楼2013-11-16 11:12:07