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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
10楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2014-03-27 10:16:23
好的,谢谢啦~~
还有配方里写的是6.7 %   YNB ,那10*YNB为什么是134g溶于1L水?10*的为什么要配13.4%的?
100 ml 10×D 这个是葡萄糖吧?
YNB和葡萄糖都要在超净台里加到灭菌后的水里,那怎么保证于 60 度下加 ...

你好,配方有误,应该是6.7‰的YNB,帖子中无法更改,只能在后面补充。10*指配成母液,很多培养基都是这样配置的,仅为方便。

60 度加入是针对固体培养基来说的,一般加热融化后,水浴60℃保温一段时间,然后拿至操作台加其他组分。
液体培养基就无所谓温度了。
Thank-you,so-blue.
11楼2014-03-27 17:30:42
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
10楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2014-03-27 10:16:23
好的,谢谢啦~~
还有配方里写的是6.7 %   YNB ,那10*YNB为什么是134g溶于1L水?10*的为什么要配13.4%的?
100 ml 10×D 这个是葡萄糖吧?
YNB和葡萄糖都要在超净台里加到灭菌后的水里,那怎么保证于 60 度下加 ...

一般10×母液,是指加入的时候,按十分之一的比例来加的。YNB一般用于毕赤酵母培养基时,加入的量是13.4‰ YNB,是酿酒酵母的两倍,所以是10×,用于酿酒酵母用量减半了,故这里严格来说YNB算20×母液才对。帖子写得仓促,这些细节没有注意到。
Thank-you,so-blue.
12楼2014-03-27 17:38:00
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by susizheng at 2014-03-27 17:30:42
你好,配方有误,应该是6.7‰的YNB,帖子中无法更改,只能在后面补充。10*指配成母液,很多培养基都是这样配置的,仅为方便。

60 度加入是针对固体培养基来说的,一般加热融化后,水浴60℃保温一段时间,然后拿 ...

嗯,我后来配的时候发现了,灭完菌之后放在65度烘箱里保温的,然后在超净台里面加YNB和AA的时候就差不多是60度,嘿嘿
13楼2014-03-28 09:01:13
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by susizheng at 2014-03-27 17:38:00
一般10×母液,是指加入的时候,按十分之一的比例来加的。YNB一般用于毕赤酵母培养基时,加入的量是13.4‰ YNB,是酿酒酵母的两倍,所以是10×,用于酿酒酵母用量减半了,故这里严格来说YNB算20×母液才对。帖子写 ...

这个样子啊,了解啦,3Q
14楼2014-03-28 09:02:17
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,我又来了。。。你长种子和发酵的时候培养基中加YNB吗?还是另外用那些(NH4)2SO4,  KH2PO4,  MgSO4  7H2O, Antifoam 289 ,  trace metals,and vitamins啥的?我看一些文献里都是用酿酒酵母限制性培养基
15楼2014-05-07 11:04:10
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
15楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2014-05-07 11:04:10
楼主,我又来了。。。你长种子和发酵的时候培养基中加YNB吗?还是另外用那些(NH4)2SO4,  KH2PO4,  MgSO4  7H2O, Antifoam 289 ,  trace metals,and vitamins啥的?我看一些文献里都是用酿酒酵母限制性培养基

SD培养基主要是用来筛选用的,发酵可能不会用这个培养基。
Thank-you,so-blue.
16楼2014-05-07 11:38:26
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by susizheng at 2014-05-07 11:38:26
SD培养基主要是用来筛选用的,发酵可能不会用这个培养基。...

好的吧
17楼2014-05-07 12:24:21
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我购买了PichiaPink™表达菌株,是Ade筛选的,但是我现在不知道它的基因型,请问我该怎么配选择培养基呀?不可能除了Ade以外那么多氨基酸都配一下吧?谢谢
Only the strong survive.
18楼2014-12-11 22:13:44
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lly198784

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,请问pδ-UB质粒哪里能得到啊?谢谢!
19楼2015-06-04 00:53:15
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赵怀燕

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问有pdr196载体吗?
20楼2015-07-16 15:58:35
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