24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1494  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

huangyan0517

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE出问题了,高手指教

溶液都是新配的,15%分离胶,5%浓缩胶,2倍loading buffer我自己配的。下图里,前两个用到是我用自己的buffer做的marker,就是检验一下buffer好不好,只有两种蛋白溶菌酶和BSA,后面是买的marker。在后是我的样品,现在问题是,我的loading buffer好像不怎么样,同时蛋白跑的距离太短,以前同样条件基本上跑到底了,现在才在中间。问题出在哪?
SDS-PAGE出问题了,高手指教
20131114002.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

时间在哪里,成就就在哪里
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-14 23:24:32
15%的SDS-PAGE有点浓,的确容易出现这种情况,但是不应该出现MARKER缺带的情况,看看你的marker是多大分子量的,能不能用15%的胶,其次你的PAGE胶配的不够好,从新配的好,电泳液我一般可以用3-4次,电流我用50mA,电压有时到100-200V,胶都有点烫了也没有关系,pH只要差的不多就行,我们使用pH试纸测的,用5.5-9.0的试纸
7楼2013-11-14 20:59:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

huangyan0517

金虫 (小有名气)

电压为80V,30min,120V,50min。高不高?
时间在哪里,成就就在哪里
2楼2013-11-14 10:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-14 23:24:24
胶不是很清晰,检查配胶缓冲液的pH,电泳缓冲液是不是对。如果蛋白的迁移率差很多,可能是丙烯酰胺母液中的丙烯酰胺:甲叉丙烯酰胺的比例不对。如果怀疑是loading buffer的问题,重新配置一下看看。
3楼2013-11-14 13:31:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangyan0517 at 2013-11-14 10:57:44
电压为80V,30min,120V,50min。高不高?

小胶一般就这么跑的。你的电泳过程中电流是多少?
4楼2013-11-14 13:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600,专业课化工原理,320分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-29 4/200 2026-03-29 23:12 by Evan_Liu
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +4 Nadiums 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:00 by 唐沐儿
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +7 李李不服输 2026-03-26 7/350 2026-03-29 16:25 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 数一英一271专硕(085401)求调剂,可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
信息提示
请填处理意见