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colby_yan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 饿到天明 at 2013-11-12 10:50:14
最简单方法 降柱温 降到10度试试看

柱温现在是25度,还要降柱温吗?将柱温的效果明显吗?
11楼2013-11-12 13:47:03
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by colby_yan at 2013-11-12 08:57:54
紫外吸收波长200-215nm,用的Waters Atlantis T3色谱柱,单独的甘氨酸进样分析会出峰。只是现在在甘氨酸的峰后面还有一个峰,并且分不开,所以向各位请教。...

甘氨酸是否是纯品?会不会有其他杂质氨基酸?
嘻哈哈
12楼2013-11-12 15:53:49
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colby_yan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-11-12 15:53:49
甘氨酸是否是纯品?会不会有其他杂质氨基酸?...

我把样品进样分析,在4.1min左右有一个峰,单独进甘氨酸的样品在4min有一个峰,然后在样品里面加入一定量的甘氨酸后再进样分析,发现在4min中时开始出峰,但是这个峰的右侧会出现鼓包,很可能是4.1min的样品峰跟甘氨酸的峰重叠所致。
13楼2013-11-13 08:46:18
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swallow13

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

14楼2013-11-13 09:54:53
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-13 09:54:53
一般来讲 氨基酸本身紫外吸收非常弱 所以做氨基酸分析的时候都需要进行柱前衍生 将一些具有强紫外吸收的物质连接到氨基酸上然后才进行分析 所以lz直接进甘氨酸样品在4.1分钟观察到的色谱峰是否是甘氨酸仍存在质疑  ...

楼上说的很有道理,除了个别含有苯环的氨基酸外,其他氨基酸的紫外吸收比较弱,一般需要衍生处理。或者使用蒸发光散射检测器分析之。
嘻哈哈
15楼2013-11-13 13:32:59
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
空白做了没有,根据你的描述,你的色谱保留并不好,看看是否空白有干扰
16楼2013-11-13 14:49:41
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colby_yan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-13 09:54:53
一般来讲 氨基酸本身紫外吸收非常弱 所以做氨基酸分析的时候都需要进行柱前衍生 将一些具有强紫外吸收的物质连接到氨基酸上然后才进行分析 所以lz直接进甘氨酸样品在4.1分钟观察到的色谱峰是否是甘氨酸仍存在质疑  ...

我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊,只是对于我的样品而言在4.1min有个峰,可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊,我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开,用什么方法可以分开呢?
17楼2013-11-14 09:16:46
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colby_yan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-11-13 13:32:59
楼上说的很有道理,除了个别含有苯环的氨基酸外,其他氨基酸的紫外吸收比较弱,一般需要衍生处理。或者使用蒸发光散射检测器分析之。...

我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊,只是对于我的样品而言在4.1min有个峰,可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊,我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开,用什么方法可以分开呢?
18楼2013-11-14 09:17:03
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colby_yan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by yugijiang at 2013-11-13 14:49:41
空白做了没有,根据你的描述,你的色谱保留并不好,看看是否空白有干扰

空白?是用纯的甘氨酸进样分析吗?进过了,单独进甘氨酸时,样品在4min出峰。
19楼2013-11-14 09:18:31
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by colby_yan at 2013-11-14 09:17:03
我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊,只是对于我的样品而言在4.1min有个峰,可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊,我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开,用什么方法可以分开呢?...

试试改变流动相的极性,梯度放缓一些。楼主单独进甘氨酸有峰,是否可通过测不同浓度的甘氨酸,看看4Min峰面积的大小是否有变化?4.1min的峰大小是否有变化?这样可以确定杂质的来源,同时做做空白对照。
嘻哈哈
20楼2013-11-14 10:45:12
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