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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 甘氨酸液相分析时无法分开
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colby_yan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 饿到天明 at 2013-11-12 10:50:14
最简单方法 降柱温 降到10度试试看

柱温现在是25度，还要降柱温吗？将柱温的效果明显吗？
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11楼2013-11-12 13:47:03
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by colby_yan at 2013-11-12 08:57:54
紫外吸收波长200-215nm，用的Waters Atlantis T3色谱柱，单独的甘氨酸进样分析会出峰。只是现在在甘氨酸的峰后面还有一个峰，并且分不开，所以向各位请教。...

甘氨酸是否是纯品？会不会有其他杂质氨基酸？
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嘻哈哈
12楼2013-11-12 15:53:49
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colby_yan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-11-12 15:53:49
甘氨酸是否是纯品？会不会有其他杂质氨基酸？...

我把样品进样分析，在4.1min左右有一个峰，单独进甘氨酸的样品在4min有一个峰，然后在样品里面加入一定量的甘氨酸后再进样分析，发现在4min中时开始出峰，但是这个峰的右侧会出现鼓包，很可能是4.1min的样品峰跟甘氨酸的峰重叠所致。
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13楼2013-11-13 08:46:18
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swallow13

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
14楼2013-11-13 09:54:53
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-13 09:54:53
一般来讲 氨基酸本身紫外吸收非常弱 所以做氨基酸分析的时候都需要进行柱前衍生 将一些具有强紫外吸收的物质连接到氨基酸上然后才进行分析 所以lz直接进甘氨酸样品在4.1分钟观察到的色谱峰是否是甘氨酸仍存在质疑  ...

楼上说的很有道理，除了个别含有苯环的氨基酸外，其他氨基酸的紫外吸收比较弱，一般需要衍生处理。或者使用蒸发光散射检测器分析之。
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嘻哈哈
15楼2013-11-13 13:32:59
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
空白做了没有，根据你的描述，你的色谱保留并不好，看看是否空白有干扰
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16楼2013-11-13 14:49:41
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colby_yan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-13 09:54:53
一般来讲 氨基酸本身紫外吸收非常弱 所以做氨基酸分析的时候都需要进行柱前衍生 将一些具有强紫外吸收的物质连接到氨基酸上然后才进行分析 所以lz直接进甘氨酸样品在4.1分钟观察到的色谱峰是否是甘氨酸仍存在质疑  ...

我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊，只是对于我的样品而言在4.1min有个峰，可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊，我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开，用什么方法可以分开呢？
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17楼2013-11-14 09:16:46
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colby_yan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-11-13 13:32:59
楼上说的很有道理，除了个别含有苯环的氨基酸外，其他氨基酸的紫外吸收比较弱，一般需要衍生处理。或者使用蒸发光散射检测器分析之。...

我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊，只是对于我的样品而言在4.1min有个峰，可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊，我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开，用什么方法可以分开呢？
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18楼2013-11-14 09:17:03
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colby_yan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by yugijiang at 2013-11-13 14:49:41
空白做了没有，根据你的描述，你的色谱保留并不好，看看是否空白有干扰

空白？是用纯的甘氨酸进样分析吗？进过了，单独进甘氨酸时，样品在4min出峰。
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19楼2013-11-14 09:18:31
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by colby_yan at 2013-11-14 09:17:03
我单独的甘氨酸进样分析在4min出峰的啊，只是对于我的样品而言在4.1min有个峰，可以确定不是甘氨酸。所以说甘氨酸应该是可以出峰的啊，我现在的问题是4min的甘氨酸和4.1min的物质分不开，用什么方法可以分开呢？...

试试改变流动相的极性，梯度放缓一些。楼主单独进甘氨酸有峰，是否可通过测不同浓度的甘氨酸，看看4Ｍｉｎ峰面积的大小是否有变化？４．１ｍｉｎ的峰大小是否有变化？这样可以确定杂质的来源，同时做做空白对照。
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嘻哈哈
20楼2013-11-14 10:45:12
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