应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 镍柱亲和层析纯化
51/1返回列表
查看: 6278  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gengpy470

新虫 (小有名气)

[求助] 镍柱亲和层析纯化

求助各位高手，我做的是真核细胞内纯化his标签蛋白，做镍柱亲和层析时在流穿的部分也检测到目的蛋白了，我的裂解液里含10mM咪唑，请大家帮我分析一下原因
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 结构生物学

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-11-08 10:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-18 17:25:45
1、可以在样品中添加适量的尿素
2、建议样品浓缩之后再上样
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-18 16:42:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-18 17:25:26
10mM咪唑就将目的蛋白洗脱了？
有可能真核蛋白各种修饰和折叠较多，将his标签包埋在内部了。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2013-11-08 15:16:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gengpy470

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2013-11-08 15:16:56
10mM咪唑就将目的蛋白洗脱了？
有可能真核蛋白各种修饰和折叠较多，将his标签包埋在内部了。

那我要是加变性剂脲的话，在裂解液，漂洗液，和洗脱液里都需要加吗，我认为在洗脱液里不需要加了吧
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-08 16:39:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
不用吧，只需要在变性的时候加变形剂吧。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
4楼2013-11-08 17:13:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭