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lwzy888

金虫 (小有名气)

[求助] DGGE图模糊,没有特别亮的条带是什么原因

最近一直在做DGGE,每次图都有问题,这次的图比之前的稍微好点,可是还是条带模糊,请问各位是什么原因呢?
1.从左边数1-4是一种样品,只是上样量不同,有4管浓缩成的10μ,15μ,20μ的样,还有8管浓缩成的10μ的样。5-8也是同样的上样量。
   可以发现,不管加多少量,条带的亮度都是一样的。这很奇怪。
2.我是用的200V,4.5小时。
3.采用gel red染色,染色半小时。取1.5μ原液稀释10000倍,然后均匀滴到胶上。个人感觉也可能与这种方法染色不均匀有关。不知道是不是。
4.胶浓度是35%-55%。
5.染色后发现泳道弯曲,是不是因为夹板没有夹紧的原因呢?
DGGE图模糊,没有特别亮的条带是什么原因
Administrator 2013-11-02 19 时 49 分.jpg
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开云者

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-11-08 23:15:09
1:下图的条带弯曲可能是你电压太高,或者你没有凝胶好,让它多凝一会,把梳子也注意一些2:DGGE的你是不是点样点到带有加热棒的那一面了?不是的话,可能是一直用200V跑的原因,可以试试先200V跑10分钟,再150V6个小时
挥霍不起青春
3楼2013-11-07 21:10:40
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