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晓风眷月

金虫 (正式写手)

[求助] 用邻二氮菲测定羟基自由基清除活性

我在用邻二氮菲测定羟基自由基清除活性的时候,发现样品是水溶性的测定的效果还好,用纯水做对照的A(未损)可以达到1.1左右,可是换成用甲醇溶解的醇溶性样品,用甲醇作对照的A(未损)基本就无颜色了,而之前用水做的A(未损)37度水浴一个小时后,还有明显的橙黄色,是不是这种方法不适合做醇溶性的物质?求各位大神解惑
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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release53: 金币+1, 辛苦了,欢迎常来分析版 2013-11-05 21:57:49
晓风眷月: 金币+5, 有帮助 2013-11-07 10:24:48
羟基自由基清除实验室可以做醇溶性的样品的,但是得保证样品和反应体系不浑浊,我做过95%的醇提的样品,未出现你说的上述情况,和水溶性的未损伤、损伤的差值是一样的。
2楼2013-11-05 21:28:35
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

可以试一下丙酮溶液做羟基实验。配溶液的时候浓度不要高。
4楼2013-11-09 14:47:40
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by a416463 at 2013-12-02 21:59:55
楼主能不能告诉我你的各物质的加量,我现在也做这个,做了好久啊,缓冲液是PBS吗,一定要帮帮我啊谢谢...

7.4的磷酸缓冲溶液2ml,邻二氮菲1ml,硫酸亚铁1ml过氧化氢1ml样品1ml
凌关庭的抗氧化食品与健康上有的,要不给我邮件我给你发文章
7楼2013-12-03 11:17:10
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by a416463 at 2013-12-02 21:57:50
丙酮真的行吗?求指导...

应该可以的。我试过用丙酮提取物质,实验是成功了
8楼2013-12-03 11:18:25
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a416463

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 448161058 at 2013-12-03 11:57:37
样品的浓度太大了吧,我都是配微克级的浓度...

我是最大浓度512微克,浓度太小活性就不好了吧
13楼2013-12-03 16:27:19
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

我做的时候羟基自由基最大的是300微克吧!清除率在90%左右,缓冲溶液、邻二氮菲、样品、硫酸亚铁、过氧化氢,保温一个小时37℃,你吧浓度放小点做一下。
15楼2013-12-03 18:10:58
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

18楼2014-09-11 17:54:52
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晓风眷月

金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by 448161058 at 2013-11-05 21:28:35
羟基自由基清除实验室可以做醇溶性的样品的,但是得保证样品和反应体系不浑浊,我做过95%的醇提的样品,未出现你说的上述情况,和水溶性的未损伤、损伤的差值是一样的。

我又用VE做了一下,发现醇溶性的效果实在是不好,不过确实我的样品在做的时候感觉有少许的悬浮物,只能放弃这个方法了,唉
感性大于理性的理科人
3楼2013-11-07 10:08:54
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a416463

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 448161058 at 2013-11-09 14:47:40
可以试一下丙酮溶液做羟基实验。配溶液的时候浓度不要高。

丙酮真的行吗?求指导
5楼2013-12-02 21:57:50
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a416463

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 448161058 at 2013-11-05 21:28:35
羟基自由基清除实验室可以做醇溶性的样品的,但是得保证样品和反应体系不浑浊,我做过95%的醇提的样品,未出现你说的上述情况,和水溶性的未损伤、损伤的差值是一样的。

楼主能不能告诉我你的各物质的加量,我现在也做这个,做了好久啊,缓冲液是PBS吗,一定要帮帮我啊谢谢
6楼2013-12-02 21:59:55
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a416463

金虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by 448161058 at 2013-12-03 11:17:10
7.4的磷酸缓冲溶液2ml,邻二氮菲1ml,硫酸亚铁1ml过氧化氢1ml样品1ml
凌关庭的抗氧化食品与健康上有的,要不给我邮件我给你发文章...

我的药物好奇怪,只有药物的乙醇溶液,加了PBS就变色了,变成了橙黄色,最后测吸光度还很大,我无语了,折腾了好久了啊
9楼2013-12-03 11:26:11
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a416463

金虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by 448161058 at 2013-12-03 11:17:10
7.4的磷酸缓冲溶液2ml,邻二氮菲1ml,硫酸亚铁1ml过氧化氢1ml样品1ml
凌关庭的抗氧化食品与健康上有的,要不给我邮件我给你发文章...

我用的是96孔板,药物很多,你有做96孔板吗
10楼2013-12-03 11:29:23
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