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晓风眷月

金虫 (正式写手)

[求助] 用邻二氮菲测定羟基自由基清除活性

我在用邻二氮菲测定羟基自由基清除活性的时候,发现样品是水溶性的测定的效果还好,用纯水做对照的A(未损)可以达到1.1左右,可是换成用甲醇溶解的醇溶性样品,用甲醇作对照的A(未损)基本就无颜色了,而之前用水做的A(未损)37度水浴一个小时后,还有明显的橙黄色,是不是这种方法不适合做醇溶性的物质?求各位大神解惑
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感性大于理性的理科人
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路漫漫9575

木虫 (正式写手)

同问,我的方法如下:2.1mM的邻二氮菲0.5mL,0.05mol/LpH7.4的缓冲液1.4mL,样品的dmso溶液0.1mL,混匀后加入2.1mM的硫酸亚铁0.5mL,混匀,加入0.03%的H2O2 0.5mL,37度反应1小时,536nm测吸光度为A样,损伤管将0.1mL的样品dmso溶液换成了纯dmso,未损伤管将0.1mL的样品dmso溶液换成了纯dmso,同时将0.03%的H2O2 0.5mL换成了双蒸水0.5ml,但是测出来的值很奇怪,线性很差,而且刚开始斜率小,后面斜率变大,还有就是样品浓度大的时候会出现样品的吸光度大于未损伤管的吸光度,不知道哪里有问题?先谢谢了!
22楼2016-03-31 20:39:24
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
release53: 金币+1, 辛苦了,欢迎常来分析版 2013-11-05 21:57:49
晓风眷月: 金币+5, 有帮助 2013-11-07 10:24:48
羟基自由基清除实验室可以做醇溶性的样品的,但是得保证样品和反应体系不浑浊,我做过95%的醇提的样品,未出现你说的上述情况,和水溶性的未损伤、损伤的差值是一样的。
2楼2013-11-05 21:28:35
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晓风眷月

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 448161058 at 2013-11-05 21:28:35
羟基自由基清除实验室可以做醇溶性的样品的,但是得保证样品和反应体系不浑浊,我做过95%的醇提的样品,未出现你说的上述情况,和水溶性的未损伤、损伤的差值是一样的。

我又用VE做了一下,发现醇溶性的效果实在是不好,不过确实我的样品在做的时候感觉有少许的悬浮物,只能放弃这个方法了,唉
感性大于理性的理科人
3楼2013-11-07 10:08:54
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448161058

铁杆木虫 (著名写手)

可以试一下丙酮溶液做羟基实验。配溶液的时候浓度不要高。
4楼2013-11-09 14:47:40
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