24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 4007  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

benpaopinle

金虫 (小有名气)

[求助] 氨基DNA与羧基CdTe量子点的连接

各位大侠,小虫一直尝试EDC/NHS连接氨基DNA和羧基CdTe量子点,都没能成功,参考的文献做法不大一样,但原理应该是一致的,不知问题出在哪儿,焦急等待大侠相助!!!我用的缓冲液是PB,活化液pH为6.0,50mM,不另外加盐;反应液pH为7.4,10mM,另外含有100mM的KCl!尝试用pH6.0的缓冲液溶解量子点,并加入一定量的EDC/NHS(约100倍于量子点的浓度),经活化后,放置一夜,有黑色颗粒或絮状沉淀产生,此时还有荧光,当离心后,上清液无荧光,将黑色颗粒超声分散到pH7.4的缓冲液后,再测没有荧光了!还尝试过直接用pH7.4 的缓冲液直接加EDC/NHS活化2h,后加入DNA 的,最后溶液也没了荧光。前后两次的溶液都为2mL,量子点浓度约为50nM,DNA为0.75uM!求助各位有经验的大侠相助,会追加金币!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vercyxu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lucasone at 2013-11-18 14:48:29
第一种情况可以很明确的回答你,羧基稳定的量子点(MPA或者TGA),是不能在酸性条件下稳定存在的,所以你的6.0的缓冲溶液是不行的,酸性条件下会导致量子点团聚沉淀,然后没有荧光;你的第二种方法应该是正确的,一 ...

您好,我最近也在做量子点连接蛋白质,我是大概按照您说的第二种方法做的,不过还有点不一样。想问下用超滤管离心的作用是什么?超滤管怎么选择截留分子量呢?还有离心的转速时间怎么选择呢?我的做法是现在量子点加抗体再加EDC和NHS,搅拌2小时,然后用滤膜过滤掉大颗粒,再用超滤管离心去掉没反应的蛋白,但是最后测得结果不理想,不知道问题出在哪儿?
16楼2014-03-12 10:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 benpaopinle 的主题更新
信息提示
请填处理意见