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血色浪漫one

新虫 (初入文坛)


[交流] 做松树的蛋白组学,关于后期验证实验的问题

我想做几个差异蛋白在mRNA水平表达差异的验证实验,但是物种序列未知(松树),请教各位,我该怎么设计引物呢? 如果想合成抗体,有多大把握?
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血色浪漫one

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by spth2o at 2013-11-05 19:42:23
可以寻找别人发表的est文库或者是NCBI,看有没有你的这个蛋白基因序列,这样的话就比较好设计引物的。如果找不到的话那应该先做RACE,把这些基因克隆出来再做鉴定了。如果是做抗体话还是需要目的基因的序列,再去寻 ...

有的是有的,但是是别的物种,不知道保守性如何啊
3楼2013-11-08 11:08:14
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spth2o

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以寻找别人发表的est文库或者是NCBI,看有没有你的这个蛋白基因序列,这样的话就比较好设计引物的。如果找不到的话那应该先做RACE,把这些基因克隆出来再做鉴定了。如果是做抗体话还是需要目的基因的序列,再去寻找比较好的免疫原位点。
2楼2013-11-05 19:42:23
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