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定量PCR实验中关于标曲和溶解曲线的问题
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最近做定量，结果总是不太好，总之有三个大问题：1、标曲不太好（R2太低）；2、扩增效率太高或太低；3、溶解曲线出现多个峰，而且前面的部分呈震荡趋势。 其中水也换过，引物也换过，就是结果不好，蛋都要碎了。。。。 标曲不很好原以为是混的不均匀（原来只用手轻弹十几下用枪混匀十几下），后来标曲稀释的时候用漩涡振荡器混匀，但结果还是不是很好（R2<0.98），而且扩增效率明显增大了很多。。。。 求大神指点迷津！！！  标曲.jpg  溶解曲线.jpg |
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2楼2013-11-01 11:20:38
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
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3楼2013-11-01 12:28:14
4楼2013-11-01 14:31:50