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mmcniu

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[求助] 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株

RaCC results:

Red = rare Arg codons AGG, AGA, CGA
Green = rare Leu codon CTA
Blue = rare Ile codon ATA
Orange = rare Pro codon CCC

其中含有一个CGA，Rosetta也不能解决这个问题（其他的都ok），该怎么办呢？我要放弃原核表达吗？

第一次做这方面实验，请有经验的多多帮助，谢谢！！！

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1楼 2013-10-27 23:04:33

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mmcniu

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引用回帖:

9楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-29 16:08:17
CGA——>精氨酸（Arg/R），同义密码子有CGU,CGG,CGC,AGA,AGG，其中CGU,CGC不是稀有密码子。

所以可以设计引物，把CGA突变成CGU/CGC。

如果这CGA靠近两端，就比较省事了；如果在基因中间，就得设计两对引物 ...

非常清楚，了解啦，(*^__^*) 嘻嘻……谢谢O(∩_∩)O谢谢

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11楼2013-10-29 22:53:34

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bleach060452

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-28 12:18:38
mmcniu: 金币+1, 3x 2013-10-30 21:17:21
mmcniu: 金币+1, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:17:56

你这个稀有密码子，也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变，或者干脆换真核表达

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岂能尽如人意，但求无愧我心