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land678

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-21 16:42:36
非常感谢,楼主我的作法跟你一样,但我测的时候出现问题了。每个样吸光度都大于1,连蛋白质浓度是0的时候也是大于1,楼主现在做的咋样了?感谢交流~~~~~...

把配好的考马斯亮蓝用滤纸过滤一下除渣。你的对照调零的加的是什么?是1mL蒸馏水和5mL考马斯亮蓝吗?
发现问题,解决问题!
11楼2013-10-21 16:56:19
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zhaoh628

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

12楼2013-10-22 14:12:19
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棉花糖_ONE_

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这是个概率事件,一般两个9就可以了,我之前基本上是每周做一个标曲,后来又一次急着要结果做标曲也比较快比较随意,结果竟然是三个9……
坑爹的专业……
13楼2013-10-22 15:04:12
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land678

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-22 14:12:19
谢谢回复,我用滤膜过滤了。对照是加的1ml蒸馏水和5ml考马斯亮蓝。我今天测了一遍,吸光度小于1了,但是标准曲线还是没有做出来,没有规律。还有一个问题,我的考马斯亮蓝再加入磷酸后颜色是砖红色,但是定容加入水 ...

貌似没有出现你说的那种情况
发现问题,解决问题!
14楼2013-10-23 16:07:35
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land678

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-22 14:12:19
谢谢回复,我用滤膜过滤了。对照是加的1ml蒸馏水和5ml考马斯亮蓝。我今天测了一遍,吸光度小于1了,但是标准曲线还是没有做出来,没有规律。还有一个问题,我的考马斯亮蓝再加入磷酸后颜色是砖红色,但是定容加入水 ...

我做的时候没有出现你说的那种情况。做标准曲线的时候,用2个比色皿,一个对照用,另一个装样品;因为每个比色皿之间吸光度有差值。
发现问题,解决问题!
15楼2013-10-23 16:09:41
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小小晓

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多做几个数值,删除掉不好的就可以了,考马斯亮蓝法测定就是不太稳定,因为是染色法,数字不稳定
学着生活吧!
16楼2013-10-23 16:50:10
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httarea

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,我看你两次测量求平均值,这两次差得也太大了。你是不是测未知样的时候也是测了两次求平均值啊?得到预想的结果了吗?
失败乃成功之母
17楼2013-12-24 10:34:14
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王丹丹4545

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的蛋白浓度是没加染液前的的浓度吧?那你计算出来的待测样品浓度也应该是没加染液前的浓度
18楼2015-05-09 12:08:32
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近水曲澜

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by land678 at 2013-10-20 19:52:27
牛血清白蛋白 配成100μg/ml
分别精确吸取牛血清白蛋白标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于试管中,加蒸馏水至1 mL,然后在各支试管中分别加入5.0 mL考马斯亮蓝G-250溶液,摇匀,在595 nm波长处测定吸光度,以标 ...

请问一共六毫升溶液,不用稀释就测吗?那是不是只有一个平行

发自小木虫Android客户端
19楼2017-12-07 09:15:15
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梦与命

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
0.97,0.98可以用吗
20楼2018-08-11 08:26:54
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