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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于考马斯亮蓝测定蛋白质中牛血清蛋白标准曲线的制作
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land678

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-21 16:42:36
非常感谢，楼主我的作法跟你一样，但我测的时候出现问题了。每个样吸光度都大于1，连蛋白质浓度是0的时候也是大于1，楼主现在做的咋样了？感谢交流~~~~~...

把配好的考马斯亮蓝用滤纸过滤一下除渣。你的对照调零的加的是什么？是1mL蒸馏水和5mL考马斯亮蓝吗？
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发现问题，解决问题！
11楼2013-10-21 16:56:19
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zhaoh628

禁虫 (初入文坛)
★
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12楼2013-10-22 14:12:19
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棉花糖_ONE_

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这是个概率事件，一般两个9就可以了，我之前基本上是每周做一个标曲，后来又一次急着要结果做标曲也比较快比较随意，结果竟然是三个9……
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坑爹的专业……
13楼2013-10-22 15:04:12
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land678

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-22 14:12:19
谢谢回复，我用滤膜过滤了。对照是加的1ml蒸馏水和5ml考马斯亮蓝。我今天测了一遍，吸光度小于1了，但是标准曲线还是没有做出来，没有规律。还有一个问题，我的考马斯亮蓝再加入磷酸后颜色是砖红色，但是定容加入水 ...

貌似没有出现你说的那种情况
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发现问题，解决问题！
14楼2013-10-23 16:07:35
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land678

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by zhaoh628 at 2013-10-22 14:12:19
谢谢回复，我用滤膜过滤了。对照是加的1ml蒸馏水和5ml考马斯亮蓝。我今天测了一遍，吸光度小于1了，但是标准曲线还是没有做出来，没有规律。还有一个问题，我的考马斯亮蓝再加入磷酸后颜色是砖红色，但是定容加入水 ...

我做的时候没有出现你说的那种情况。做标准曲线的时候，用2个比色皿，一个对照用，另一个装样品；因为每个比色皿之间吸光度有差值。
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发现问题，解决问题！
15楼2013-10-23 16:09:41
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小小晓

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多做几个数值，删除掉不好的就可以了，考马斯亮蓝法测定就是不太稳定，因为是染色法，数字不稳定
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学着生活吧！
16楼2013-10-23 16:50:10
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httarea

木虫 (小有名气)
★
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楼主，我看你两次测量求平均值，这两次差得也太大了。你是不是测未知样的时候也是测了两次求平均值啊？得到预想的结果了吗？
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失败乃成功之母
17楼2013-12-24 10:34:14
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王丹丹4545

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的蛋白浓度是没加染液前的的浓度吧？那你计算出来的待测样品浓度也应该是没加染液前的浓度
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18楼2015-05-09 12:08:32
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近水曲澜

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by land678 at 2013-10-20 19:52:27
牛血清白蛋白 配成100μg/ml
分别精确吸取牛血清白蛋白标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于试管中,加蒸馏水至1 mL,然后在各支试管中分别加入5.0 mL考马斯亮蓝G-250溶液,摇匀,在595 nm波长处测定吸光度,以标 ...

请问一共六毫升溶液，不用稀释就测吗？那是不是只有一个平行

发自小木虫Android客户端
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19楼2017-12-07 09:15:15
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梦与命

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
0.97,0.98可以用吗
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20楼2018-08-11 08:26:54
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