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秦运杰223

铜虫 (正式写手)


[交流] 求助----原核表达问题:实际表达的蛋白大小与预测的相差较大

本人做原核表达开始还比较顺利,从目的基因扩增到表达载体的构建等一步步走过来,到蛋白表达,期间做了几次都没有成功,目的条带预计是50kda左右,而实际表达蛋白经蛋白电泳20左右,所构建的原核表达载体测序正确,不知道可能会是什么原因?求各位帮忙指教!!
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youdao1

铁虫 (知名作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
愿楼主心想事成
7楼2013-10-10 11:05:58
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freedom767

铁虫 (知名作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
8楼2013-10-10 11:08:00
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oneday1234

铁虫 (知名作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
Good luck
9楼2013-10-10 11:08:59
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pigit9999

铁虫 (知名作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
Best wishes
10楼2013-10-10 11:09:03
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
你先看看你的阅读框有没有移位,链接到载体上看看有没有提前终止的,如果这些都没有问题的话,在考虑表达的问题。
11楼2013-10-10 15:17:28
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)


原核表达 PET-30载体 目的蛋白分子量偏小?
http://muchong.com/html/201203/4185335.html
20楼2013-10-10 20:02:09
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b729

金虫 (文坛精英)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
24楼2013-10-10 20:18:07
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checkin

银虫 (知名作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
Best wishes
25楼2013-10-10 20:18:08
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yzq小二郎

银虫 (小有名气)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
加油兄弟
34楼2013-10-10 20:38:15
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yangy1220

新虫 (职业作家)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
46楼2013-10-10 21:38:32
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
你的蛋白是不是由两条分子量近似的亚基组成啊,表达后以亚基状态存在。
50楼2013-10-11 08:15:06
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简单回复
wlxiao2楼
2013-10-10 10:49   回复  
秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
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user598885楼
2013-10-10 10:59   回复  
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3
2013-10-10 11:05   回复  
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阿桂金13楼
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jh838114楼
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56899523116楼
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vvv92817楼
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haixiawu19楼
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cqwhch22楼
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mooncakeaa23楼
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chendiqing44楼
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34011094145楼
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youxi247楼
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spbee48楼
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