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脑袋空空

木虫 (小有名气)

[交流] 发酵液浓缩程度 已有4人参与

我做菌,从发酵液中提取物质
现在大量发酵,总起来需要100L左右
现在有个问题,每次发酵液离心以后都要进行 乙酸乙酯 与  正丁醇  萃取,我现在大概是浓缩到发酵液体积的1/5左右再进行萃取,但还是比较麻烦;

1.我想问这个发酵液一般浓缩到多少再进行萃取?

我现在手里面只有500ml的分液漏斗,所以一次才可以萃取大约200ml,这样,我一次发酵10L,浓缩后差不多2L,又是两种溶剂,而且是等体积三次萃取,估算下来就是(2000/200*3*2=60次)而且萃取后还要浓缩,这样下来需要很长时间,所以想请大神指点下,有没有什么好的方法?

2.是进一步浓缩,还是换大点的分液漏斗还是怎么的……

请大神指点迷津……

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兰鑫
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脑袋空空

木虫 (小有名气)

可不可以浓缩成浸膏,在进行提取?如果是浸膏的话,萃取方法变不变?
兰鑫
2楼2013-10-09 15:26:12
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

★ ★
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-10-10 21:50:45
想问一下楼主,您的产物是胞内还是胞外的,如果是胞内且产物不溶于水溶液的话可以真接离心要菌饼提取就行了,要是胞外的工作量是要大很多的。祝楼主好运!
希望大家多多交流。
3楼2013-10-09 15:38:54
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脑袋空空

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2013-10-09 15:38:54
想问一下楼主,您的产物是胞内还是胞外的,如果是胞内且产物不溶于水溶液的话可以真接离心要菌饼提取就行了,要是胞外的工作量是要大很多的。祝楼主好运!

应该是胞外的,所以很麻烦……请问一下胞内胞外有什么好的方法可以检测得不?
兰鑫
4楼2013-10-10 08:09:26
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨


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引用回帖:
4楼: Originally posted by 脑袋空空 at 2013-10-10 08:09:26
应该是胞外的,所以很麻烦……请问一下胞内胞外有什么好的方法可以检测得不?...

拿少量发酵液离心,上清液和沉淀(菌饼)分别用你现在使用的有机溶剂来萃取,然后再做HPLC,看里面产物的多少就行了。
希望大家多多交流。
5楼2013-10-10 08:47:23
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分离高手

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这样干的话 恐怕要累傻了。首先你的东西在发酵液,萃取你的东西应该在丁醇相,乙酸乙酯萃取是不是只是为了出去杂质,并且直接萃取乳化还是个问题。 你讲发酵额浓缩是不是用减压浓缩,如果是那么这是一个错误的做法,因为浪费时间不说,还会造成你的物质分解。
其实浓缩现在用的最多的为1、大孔吸附,也成为固相浓缩。2、纳滤浓缩,将发酵液微滤后直接纳滤浓缩。3溶媒转换。
所以你现在要要么换方法,要么换分液漏斗。不过你分液漏斗用多大的合适呢,要不就用50L的桶搅拌萃取。其实我认为这个方法比较笨 ,也浪费时间。100L看你这个架势  怎么也得提个个把月
6楼2013-10-10 14:27:46
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脑袋空空

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 分离高手 at 2013-10-10 14:27:46
你这样干的话 恐怕要累傻了。首先你的东西在发酵液,萃取你的东西应该在丁醇相,乙酸乙酯萃取是不是只是为了出去杂质,并且直接萃取乳化还是个问题。 你讲发酵额浓缩是不是用减压浓缩,如果是那么这是一个错误的做法 ...

我原来也想过用大孔吸附,但是感觉这个下来还没有萃取来的容易~~~其他的,实验室不具备条件……
发酵液浓缩,55℃一下应该没什么问题吧,大部分物质应该不会分解吧?浪费时间倒是真的……
这个,换做大桶也是个笨方法,那还有没有别的比较不太笨的法子,总这样,就感觉体力劳动的成分好大……
请指点指点……
兰鑫
7楼2013-10-10 21:31:31
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celeryjhq

新虫 (初入文坛)


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同问,发酵液一般浓缩成什么程度再进行萃取啊?LZ用的55°旋转蒸发么?LZ乙酸乙酯萃取的时间一般用多少?
8楼2014-03-22 13:34:37
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rudy668

金虫 (小有名气)


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硫酸铵沉淀或者有机溶剂沉淀后再通过控制复溶体积来达到浓缩的效果
每日一小步,人生一大步
9楼2014-04-09 12:54:56
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