| 查看: 3570 | 回复: 25 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
美丽的家园金虫 (正式写手)
|
[求助]
切胶回收DNA失败，没经验，望指点
|
|
|
1. 吸附柱平衡：向吸附柱CB2中加入500 μL 平衡液BL，12，000 r/min 离心 1 min,弃废液，放回收集管 2. 捣碎胶，加入5倍PB结合液，混匀。60℃水浴10 min ，直到胶溶解为止，期间上下颠倒2~3次。 3. 冷却后，加入到已经平衡好的CB2中，室温2~5 min，12，000 r/min 离心 1 min,弃废液，放回收集管 4. 加入600 μL漂洗液PW (其中含80％乙醇),放置5 min，12，000 r/min 离心 1 min,弃废液，放回收集管 5. 重复上述4操作一次 6. 12，000 r/min 离心 2 min,CB2 开盖2~5 min，并甩空柱去除残留乙醇 7. 将CB2置于干净的收集管，加入洗脱液EB 30 μL，50℃ 水浴 2min，静置2~5 min 8. 12，000 r/min 离心 1 min,管底溶液为DNA 溶液 9. 去5 μL进行0.8 ％琼脂糖电泳检测 PCR 后检测有亮带，回收失败，不知还有什么需要注意的，望指点 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有50人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 切胶回收过程有可能对DNA造成损伤吗？
已经有9人回复
- 如何在切胶回收的DNA片段两端添加P32标记呢？
已经有5人回复
- DNA非变性PAGE胶 回收条带 二次PCR出现问题 急！！！
已经有6人回复
- 提取质粒之后又三条带, 需要切胶回收未开环DNA再进行酶切吗?
已经有10人回复
- 构建基因文库（sauA酶切后胶回收 效率低 该怎么办
已经有14人回复
- 目的基因片段胶回收后酶切，然后再跑胶后发现条带很弱，怎么改进（求助）
已经有8人回复
- 收工回收琼脂糖凝胶DNA片段
已经有17人回复
- 从琼脂糖凝胶中回收DNA
已经有14人回复
- 琼脂糖凝胶DNA回收
已经有6人回复
- dna切胶回收中各试剂的作用
已经有14人回复
- 胶回收后再次pcr无目的条带，急，望神人指点。。。
已经有16人回复
- 关于DNA胶回收和酶切后回收的问题，诚请指导
已经有9人回复
- 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收详细步骤
已经有5人回复
- 基因组文库构建时DNA酶切片段用胶回收吗？
已经有7人回复
- 胶回收和DNA纯化
已经有6人回复
- 如何从PAGE胶及尿素变性PAGE胶回收DNA样品
已经有7人回复
- 【求助/交流】DNA酶切回收跑胶怎么有小条带啊？[
已经有8人回复
- 【求助/交流】DNA跑胶2ul有目的带很清晰，但是胶回收时，上样量为20ul时跑电泳却降解�
已经有17人回复
- 【求助/交流】DNA琼脂糖凝胶回收，为什么回收率太低！
已经有53人回复
liyongliangx
铜虫 (小有名气)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 111.9
- 散金: 65
- 红花: 4
- 帖子: 114
- 在线: 23.5小时
- 虫号: 2225319
- 注册: 2013-01-06
- 性别: GG
- 专业: 口腔颌面组织生物力学和生
5楼2013-10-04 16:09:40
2楼2013-10-04 08:56:38
3楼2013-10-04 14:28:31
desheng101
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1926.8
- 散金: 30
- 红花: 3
- 帖子: 394
- 在线: 73.7小时
- 虫号: 1110789
- 注册: 2010-09-29
- 性别: GG
- 专业: 细胞周期与调控
4楼2013-10-04 15:27:56