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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)

[求助] 好心人帮助我看看DNA电泳图吧!

Sample Text
DNA条带下面这一团的东西是什么啊?
我加了RNA酶,蛋白也反复抽提了4次,也不太像DNA降解,求大神帮忙解惑!!
好心人帮助我看看DNA电泳图吧!
Administrator 2013-09-28 20 时 36 分.jpg
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crest0708

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
30楼: Originally posted by 墨绿的下午茶 at 2013-10-08 14:38:53
我之前是提RNA的,RNA这个材料没问题,图也很漂亮,RNA已经要送公司测序了!
现在是提DNA,本来也是要打算测序的。因为实验室CTAB法已经很成熟了,几个师姐拿不同材料提取都没有问题,到我这里当然也是用CTAB继续 ...

色素好办吧,你跑个HPLC,看看是不是,色素分子一般都很小,你如果跑过基因组或者RNA,应该看过这种弥散带的,如果跑的是蛋白,我可以肯定告诉你是糖基化造成的,但是你这个,有没有可能是甲基化!!!?(纯猜测)。建议往提纯的样品中加入去甲基化酶或者其他内切酶,单酶切之后,如果发现弥散带没了,那说明是DNA本身问题(或者这东西就是DNA),如果还有,那就上个HPLC,比较一下,酶切前后图谱,看看哪个分子没变,提纯它,鉴定一下,祝好!
34楼2013-10-16 09:33:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩。 2013-10-01 21:37:45
觉得像是没除干净的RNA。
2楼2013-10-01 00:21:09
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白菜吃虫

铜虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩。 2013-10-01 21:37:54
这是什么的DNA啊,基因组?因为我看到怎么还有个跑慢一点儿的,那个比较干净。你的材料有没有什么特殊的物质不好抽提出来呢。放一晚,第二天再电泳,如果是RNA估计就没了吧。
3楼2013-10-01 00:32:37
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DAX1

新虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩。 2013-10-01 21:38:02
感觉不太像rna啊,如果楼主是自己配置试剂提质粒,可以在溶液1里面加一点rna酶,跑电泳用基本看不到rna的。我现在懒,不愿意用试剂盒提小提,都直接溶液123然后异丙醇沉淀,乙醇洗一遍,效果一直很稳定很好。
题外话,我做了近8年的生物实验,小提用过自己配置试剂,也用过各种试剂盒,来了小木虫才发现提质粒竟然会出现那么多的问题,而且是我闻所未闻的。
4楼2013-10-01 04:05:40
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