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HIS蛋白纯化 溶菌酶
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sunlifang
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HIS蛋白纯化 溶菌酶
我在蛋白纯化时加了溶菌酶后最下方总会出现一排杂带,求高手解释,谢谢
蛋白纯化M,-28a-2,-1,1ACL2-28a-2,-1,28a-2,-1.jpg
蛋白纯化-不加溶菌酶-28a-3,2,-1,加溶菌酶-28a-4,-3,-2,-1,28a-2,-1,M.jpg
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1楼
2013-09-30 11:36:47
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2013-09-30 14:00:10
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩
2013-09-30 17:12:36
应该是溶菌酶的带,溶菌酶的理论分子量是14.3kD。
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2013-09-30 13:36:23
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Originally posted by
cicelyzh
at 2013-09-30 13:36:23
应该是溶菌酶的带,溶菌酶的理论分子量是14.3kD。
那我想再请问此带可以去除吗?用什么方法,谢谢
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2013-09-30 14:00:47
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Originally posted by
sunlifang
at 2013-09-30 14:00:47
那我想再请问此带可以去除吗?用什么方法,谢谢...
我觉得你纯化时可能是柱子洗得不充分,杂带多。理论上经镍柱纯化后应该可以除掉。
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2013-10-01 00:16:03
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2013-10-01 19:55:41
纯化操作有问题,溶菌酶没除掉。
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2013-10-01 00:42:15
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cicelyzh
at 2013-10-01 00:16:03
我觉得你纯化时可能是柱子洗得不充分,杂带多。理论上经镍柱纯化后应该可以除掉。...
我用的洗脱buffer是20mM咪唑,我正考虑加大咪唑浓度,这种是不是浓度太大了也不好?非常感谢你的回答。
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2013-10-01 19:57:16
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cicelyzh
at 2013-10-01 00:16:03
我觉得你纯化时可能是柱子洗得不充分,杂带多。理论上经镍柱纯化后应该可以除掉。...
再补充下,我用的binding buffer是20mM咪唑,wash buffer是20mM咪唑,elution buffer是500mM咪唑
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7楼
2013-10-01 20:42:50
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sunlifang
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再补充下,我用的binding buffer是20mM咪唑,wash buffer是20mM咪唑,elution buffer是500mM咪唑...
我觉得是洗得时间不够,增加洗涤时间和体积。
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sunlifang
8楼
2013-10-02 01:56:29
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好多的杂带啊!!!镍柱不行啊
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sunlifang
9楼
2013-10-02 11:23:18
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9楼
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wuyao0513
at 2013-10-02 11:23:18
好多的杂带啊!!!镍柱不行啊
柱子还是挺新的呵呵
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10楼
2013-10-02 19:28:27
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